諾博萊德  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

全血基因組DNA提qu系統(tǒng)（沉淀法） 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品貨號(hào)：D9638

產(chǎn)品名稱：全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

英文名稱：Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

產(chǎn)品規(guī)格：50T/200T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：RT，復(fù)檢期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderD9638  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的血液樣品，采用異丙醇沉淀方法，操作簡(jiǎn)便，尤其適合大量提取血液基因組DNA。提取的DNA可用于PCR、酶切等常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

本產(chǎn)品使用前請(qǐng)根據(jù)使用量將10×紅細(xì)胞裂解液用水稀釋成1×的即用型紅細(xì)胞裂解液。

操作步驟：

以1mL全血為例

1.樣品的處理：在血液中加入3倍體積的1×紅細(xì)胞裂解液(請(qǐng)確認(rèn)已經(jīng)稀釋過)，充分顛倒混勻，12000rpm離心1min(如為大量提取并且為大離心機(jī)，可11000rpm離心5min)，小心吸去上清，再加入2倍體積的1×紅細(xì)胞裂解液，用移液器輕輕吹打沉淀，充分混勻，離心，棄上清，沉淀為白細(xì)胞。

2.向沉淀中加500μL白細(xì)胞裂解液，振蕩或者用移液器吹打至che底混勻。65℃水浴10-20min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，直至溶液較為清澈看不見明顯細(xì)胞為止。

3.加入500μL蛋白沉淀液，充分顛倒混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色沉淀，65℃水浴5min，12000rpm離心5min，小心吸取上清(不要吸到下層沉淀或漂浮不溶物)，轉(zhuǎn)移到干凈離心管中，如還有沉淀物，可再次離心。

4.在上清中加入1mL異丙醇，混勻。12000rpm離心5min，可看到管底有少量白色DNA沉淀，棄掉上清。

5.向離心管中加入1mL 75%乙醇，12000rpm離心5min，棄去上清液。可再次短暫離心用移液器去除殘余上清。

6.將離心管敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，否則乙醇可能影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。

7.向離心管中加入100-300μL DNA溶解液，室溫放置讓DNA自然溶解。如果DNA難于溶解，可室溫放置過夜或?qū)㈦x心管置于50-60℃水浴中水浴加熱5min。

注意事項(xiàng)：

1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

2.若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。

3.DNA濃度及純度檢測(cè)：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/mL雙鏈DNA、40μg/mL單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。

全血基因組DNA提qu系統(tǒng)（沉淀法） 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品訂購信息

D9638  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)  50T/200T