CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒,無需預先用Calcein AM標記細胞
惡性腫瘤細胞侵入正常周圍組織的能力在很大程度上導致了癌癥的高發病率和死亡率。侵入性需要幾種不同的細胞功能,包括黏附、運動、脫落和細胞外基質蛋白水解。轉移性細胞產生許多蛋白水解酶(例如溶酶體水解酶、膠原酶、纖溶酶原激活劑),同時某些細胞表面蛋白酶受體的表達也增加。
Cell Biolabs的CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒利用涂有基底膜的插入物來檢測腫瘤細胞的侵襲特性。該試劑盒無需您預先用Calcein AM標記細胞或移除未侵入的細胞(即棉簽擦拭)。任何侵入的細胞首先從膜上分離,然后裂解并用CyQuant® GR染料檢測。
Cell Biolabs的CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒提供了一個穩健的系統,用于定量測定細胞侵襲。試劑盒包含足夠的試劑用于評估96個樣本。
艾美捷CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒(#CBA-112)檢測原理:
CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒包含一個96孔板中的聚碳酸酯膜插入物(孔徑8微米)。插入物膜的上表面涂有一層均勻的干燥基底膜基質溶液。這層基底膜作為屏障,區分侵襲性細胞和非侵襲性細胞。侵襲性細胞能夠降解該層中的基質蛋白,并最終通過聚碳酸酯膜的孔。最后,侵入的細胞從膜上分離,并隨后用CyQuant® GR染料(Invitrogen)檢測。
相關產品:
1.CBA-101-C:CytoSelect24孔細胞遷移和侵襲檢測(8微米,熒光法)
2.CBA-106-C:CytoSelect96孔細胞遷移和侵襲檢測(8微米,熒光法)
3.CBA-111:CytoSelect24孔細胞侵襲檢測(基底膜,熒光法)
4.CBA-111-COL:CytoSelect24孔細胞侵襲檢測(I型膠原,熒光法)
5.CBA-112-COL:CytoSelect96孔細胞侵襲檢測(I型膠原,熒光法)
CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒組成(室溫運輸):
1.96孔ECM侵襲板(部件編號11201):一個含有ECM涂覆插入物的無菌96孔板(見圖1了解組件)。
2.96孔細胞收獲托盤(部件編號10402):一個96孔托盤。
3.細胞分離液(部件編號10403):一瓶20毫升。
4.4倍裂解緩沖液(部件編號10404):一瓶10毫升。
5.CyQuant®GR染料(部件編號10105):一個75微升的管。
未提供材料
1.侵襲性細胞系
2.細胞培養基
3.無血清培養基,例如含有0.5%BSA、2mMCaCl?和2mMMgCl?的DMEM
4.細胞培養箱(37°C,5%CO?環境)
5.顯微鏡
6.96孔微量滴定板
7.微量滴定板讀數器
儲存
將所有組分儲存于4°C。
結果示例:
下圖顯示了CytoSelect™細胞侵襲檢測試劑盒的典型情況。以下數據僅供參考。這些數據不應用于解釋實際結果。
HT-1080細胞在細胞分離緩沖液中進行梯度稀釋,隨后用4倍裂解緩沖液/CyQuant® GR染料進行裂解和檢測(150 µL細胞懸浮液與50 µL 4倍裂解緩沖液/染料混合)。
HT-1080或NIH3T3細胞被允許向10%胎牛血清(FBS)方向侵襲24小時,實驗中加入或不加入2 µM細胞松弛素D,每次實驗使用200,000個細胞。侵入聚碳酸酯膜底部的細胞被染色(見圖),并按照實驗方案中描述的方法用CyQuant® GR染料進行定量分析。
CytoSelect 96孔細胞侵襲檢測試劑盒文獻參考:
1. Erkell, L. J., Schirrmacher, V. (1988) Cancer Res 48, 6933-6937.
2. Montgomery, A. M. P., De Clerck, Y. A., Langley, K. E., Reisfeld, R. A., Mueller, B. M. (1993)Cancer Res 53,693-700.
3. Monsky, W. L., Lin, C. Y., Aoyama, A., Kelly, T., Akiyama, S. K., Mueller, S. C., Chen, W. T.(1994) Cancer Res 54,5702-5710.
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