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線粒體活性氧產生速率(ROS)熒光法測試盒

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-03-14 11:01:22瀏覽次數:503次

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規格 100管/96樣
貨號 GOY-01S6411 應用領域 化工
主要用途 產品僅用于科研
線粒體活性氧產生速率(ROS)熒光法測試盒公司各類熱銷產品鹿尿酸氧化酶elisa檢測試劑盒
鹿內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa檢測試劑盒
鹿免疫球蛋白A(IgA)elisa檢測試劑盒免費代測
鹿氧化酶(XOD)elisa檢測試劑盒
鹿(cAMP)elisa檢測試劑盒

商品介紹:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應激與細胞生長增殖、發育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關。

正常情況下,細胞內抗氧化防御系統與氧自由基處于平衡狀態,細胞內活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細胞內抗氧化系統與氧自由基的平衡被打破,細胞內活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機體出現氧化應激,同時,活性氧還可攻擊線粒體DNA產生氧化損傷,導致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結構和功能變化。

因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內被酯酶水解,形成無熒光的DCFHDCFH迅速與ROS反應生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF) 根據上述原理設計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數據點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標儀、恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水。

產品名稱:線粒體活性氧產生速率(ROS)熒光法測試盒
規格100/96
測試方法熒光法
貨號:GOY-01S6411
分類:氧化與抗氧化系列

試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測定步驟
1
分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2
將試劑一、二、三37(哺乳動物)25(其它物種)預熱10分鐘。
3
加樣表:

圖2.jpg

樣本的前處理
FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
FBP活性計算:
1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應體系總體積,1×10-3 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.1 mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
非變性蛋白分子量標準25mg  Hydroxystilbamidine 10mg

蛋白質電泳分子量標準 (3.3-20.1KD)15   HRP 標記的兔抗 GST 標簽多抗20μL

蛋白質電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)20   HRP 標記的抗抗體10μL

蛋白質電泳分子量標準 (43.0-200.0KD)10   His 標簽蛋白專用蛋白酶抑制劑10mL

預染蛋白質電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)10   Hemoglobin(NO 清除劑 )1g

Forskolin( 腺苷酸環化酶激活劑 )1mg  Catalase( 抗氧化酶 )200mg

Genistein( 蛋白激酶抑制劑 )25mg  Carboxy-PTIO( 清除劑 )5mg

Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g  Carboxy-PTIO( 清除劑 )50mg

GSH( 抗氧化劑 )1g  Canavaninesulfate(iNOS 抑制劑 )100mg

H-89.2HCL(PKA 抑制劑 )5mg  Camptothecin( 喜樹堿 )100μL
大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)elisa分析檢測試劑盒

大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)elisa檢測試劑盒

大鼠α1抗胰糜蛋白酶(AACTelisa檢測試劑盒

大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa分析檢測試劑盒

大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa檢測試劑盒
線粒體活性氧產生速率(ROS)熒光法測試盒液體蛋白純化回收試劑盒50   SDS-PAGE 上樣液,5×1mL

石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒50   SDS-PAGE 上樣液,5×10mL

昆蟲細胞裂解液50mL  SDS-PAGE 濃縮膠配膠液500mL

植物總蛋白質微量提取試劑盒 (SDS-PAGE)30   SDS-PAGE 分離膠配膠液500mL

植物總蛋白質微量提取試劑 (2DE) 30   SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L


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