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間質(zhì)干細胞成脂和成骨誘導(dǎo)分化2017/7/18
成骨和成脂誘導(dǎo)是鑒定干細胞的一種重要的方法,也是zui常用、報道見得zui多的方法。成骨zui常用的染色方法是茜素紅染色(堿性磷酸酶),成脂誘導(dǎo)zui常用是OilRedO(油紅O)染色法。下面介紹一下...
轉(zhuǎn)化細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的操作方式2017/7/13
轉(zhuǎn)化細胞深層培養(yǎng)可分為:分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式五種。一、分批式培養(yǎng)(batchculture)是細胞規(guī)模培養(yǎng)發(fā)展進程中較早期采用的方式,也是其它操作方式的基礎(chǔ)。該方式采用機械...
腫瘤細胞培養(yǎng)方法2017/7/11
腫瘤細胞培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物等幾個方面。在具體培養(yǎng)方法方面,腫瘤細胞培養(yǎng)與正常組織細胞培養(yǎng)并無原則差別,初代培養(yǎng)應(yīng)用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。1、取材:人...
ATCC細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)介紹2017/7/6
ATCC細胞轉(zhuǎn)染方法不同,對轉(zhuǎn)染結(jié)果影響很大。常見的轉(zhuǎn)染方法有:1.磷酸鈣法:該方法利用磷酸鈣DNA復(fù)合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞原理得到瞬時或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染結(jié)果,操作簡便但重復(fù)性差,不可用于原代細胞的轉(zhuǎn)染。2...
細胞死亡的檢驗方式2017/7/4
ATCC細胞發(fā)生凋亡時具有固有的形態(tài)特征,如細胞核表現(xiàn)縮小、染色質(zhì)邊緣化、凝集,凋亡晚期還會出現(xiàn)由核碎片與胞質(zhì)內(nèi)的部分細胞器混合在一起,且被細胞膜包裹形成的凋亡小體。DNA特異性染料(如Hoechst...
細胞分裂指數(shù)操作說明書2017/6/29
【實驗用品】材料:貼壁培養(yǎng)的ATCC細胞器材:離心機、顯微鏡、血細胞計數(shù)板試劑:Hanks液、0.25%胰蛋白酶、含10%小牛血清/胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基(根據(jù)實驗需要也可以是其他種類的培養(yǎng)基)【實...
細胞生長曲線的繪制操作步驟2017/6/27
ATCC細胞實驗用品材料:貼壁培養(yǎng)的細胞器材:24孔培養(yǎng)孔板、吸管、膠帽、離心管、培養(yǎng)皿、半對數(shù)坐標紙、蓋玻片、細胞計數(shù)板、酒精棉球、酒精燈、離心機、倒置顯微鏡、普通光學(xué)顯微鏡、超凈工作臺、CO2培養(yǎng)...
分析培養(yǎng)腫瘤細胞狀態(tài)欠佳的原因2017/6/22
1、腫瘤細胞培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細胞培養(yǎng)。建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下。或根據(jù)用量決定。2、細胞外源微生物的污染:細胞不宜...
血管內(nèi)皮細胞特性2017/6/20
1.血管內(nèi)皮細胞重要標志(1)轉(zhuǎn)化細胞第Ⅷ因子關(guān)連抗原,可以由全身所有血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生,檢測這一因子主要用相應(yīng)抗體。VWF有其特異性,人的VWF抗體對牛的內(nèi)皮細胞沒有交叉反應(yīng)。兔疫熒光間接法測定該因子...
ATCC細胞肉眼觀察檢測方法2017/6/15
ATCC細胞一般常規(guī)檢查用肉眼即可觀察,主要看培養(yǎng)液的顏色和透明度的變化。培養(yǎng)細胞的觀察檢測方法大多數(shù)細胞適于在pH7.2~7.4條件下生長,低于pH6.8或高于pH7.6對細胞有害,甚至造成細胞退化...
細胞常見的轉(zhuǎn)染方法分析2017/6/13
ATCC細胞常見的轉(zhuǎn)染方法有:1.磷酸鈣法:該方法利用磷酸鈣DNA復(fù)合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞原理得到瞬時或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染結(jié)果,操作簡便但重復(fù)性差,不可用于原代細胞的轉(zhuǎn)染。2.DEAE-右旋糖苷法:帶正電的D...
腫瘤細胞培養(yǎng)技術(shù)操作注意事項2017/6/8
1.腫瘤細胞實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作...
轉(zhuǎn)化細胞實驗室*儀器簡單介紹2017/6/6
一、CO2培養(yǎng)箱CO2培養(yǎng)箱是轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)的*儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的...
腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項2017/6/1
腫瘤細胞培養(yǎng)時注意事項1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3...
ATCC細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的問題和解決方法2017/5/25
一、培養(yǎng)ATCC細胞不貼壁可能原因:胰蛋白酶消化過度支原體污染培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)細胞老化接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度分離培養(yǎng)物,檢測支原...

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