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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T |
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貨號 | BC1598 | 應用領域 | 化工,生物產業,農業,制藥 |
主要用途 | 用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白 |
諾博萊德 全蛋白提取試劑盒(強)樣本裂解
NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒(強)
產品貨號:BC1598
產品名稱:全蛋白提取試劑盒(強)
產品規格:50T / 100T
產品簡介:
中文名稱:全蛋白提取試劑盒(強)
規格:50T ; 100T
儲存條件:-20℃,avoid light,at least 1 year
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒(強)產品介紹:
全蛋白提取試劑盒(強)用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。
產品組成:
試劑名稱 | 規格 | 儲存條件 |
裂解液(強) | 100mL | 2-8℃ |
磷酸酶抑制劑(100×) | 1mL | -20℃ |
蛋白酶抑制劑(100×) | 1mL | |
PMSF(100×) | 1mL |
操作方法:
1、組織總蛋白的提取
1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;
2)稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;
3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 ℃ 12000g離心30min;
4)吸取上清至新的管中;
5)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 ℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
1)裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
2)貼壁細胞:棄去培養基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
3)懸浮細胞:4 ℃ 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
4)裂解完畢之后,將細胞裂解液4 ℃ 12000g離心30min;
5)將上清移入新的EP管中;進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 ℃,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;
諾博萊德 全蛋白提取試劑盒(強)樣本裂解
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