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鎳柱是一種在蛋白純化中廣泛應用的純化柱料,屬于固定化金屬離子親和色譜技術的一種。
鎳柱是一種在蛋白純化中廣泛應用的純化柱料,屬于固定化金屬離子親和色譜技術的一種。以下是詳細產品介紹:
鎳柱純化原理:過渡金屬通過與電子供體配基上,能與金屬離子相互作用的羧基或氨基的電負性元素(O,N),形成較穩定的金屬螯合物。在IMAC中,一個Ni2+有六個配位位點,被含有3,4或5個電子供體基團(配位位點)的螯合物固定在吸附劑上,而剩下未被占據的位點暴露于溶液中,能與一些氨基酸的側鏈或His標簽的蛋白特異性結合。
在Ni柱的使用中,應當避免緩沖液中存在還原劑和螯合劑,以免Ni2+被還原而脫落。如果柱料使用太久積累了很多雜蛋白,可用EDTA將Ni2+螯合下來,再用NaOH清洗柱料后,重新螯合Ni離子,即可完成再生。
具有高分辨率、高載量、流速快、物理和化學穩定性好等優點,適用于分離能被螯合的金屬離子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白及帶His標簽的重組蛋白等。同時,再生和清洗也相對簡便,使其成為蛋白純化領域的重要工具。