目前所使用的酵母中DNA抽提和純化的方法耗時耗力。,由于酵母細胞具有復雜蛋白質細胞壁,導致其非常難以裂解。而在Thermo Scientific Y-PER酵母DNA抽提試劑盒中,利用Thermo Scientific Y-PER酵母細胞抽提試劑可以快捷便利的裂解酵母細胞。 這種基于試劑的方法優于常規的酵母DNA分離方法。整個過程僅需一小時并且不需要酶處理或者玻璃珠裂解,同時幾乎沒有RNA污染。
在研究啤酒酵母時, 使用該酵母DNA抽提試劑盒可以穩定的獲得大量的基因組和質粒DNA。純化的DNA適用于聚合酶鏈式反應(PCR)§擴增(詳情見圖)、細菌轉化(化學法和電穿孔法制備的感受態細胞均可)、限制性內切酶消化以及雜交等實驗。
產品特點:
- 不需要玻璃珠裂解或者劇烈的酶處理。
- 制備的DNA可用于聚合酶鏈式反應(PCR)。
- 可以快速地從啤酒酵母中分離質粒DNA,分離的DNA可用于大腸桿菌的轉化。
- 放大性好 – 從單克隆到500ml培養物均可處理。
抽提酵母基因組DNA并且進行下游的PCR擴增。從轉化了含有綠色熒光蛋白(GFP)基因質粒的啤酒酵母DY150株中提取DNA,并以純化的DNA為模板擴增染色體基因ACT1和UME6以及質粒上攜帶的GFP基因。
泳道1. 用Hind III降解Lambda DNA;
泳道2. 啤酒酵母基因組DNA (分子量較小的條帶為大約5 kb,對應于酵母殺傷病毒的dsRNA);
泳道3. PCR擴增質粒中的GFP;
泳道4. PCR擴增基因組基因ACT1;
泳道5. PCR擴增基因組基因UME6。
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