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一、產品簡介

293細胞專用轉染試劑盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit，適用于HEK293細胞及其他HEK293細胞的高密度懸浮培養、DNA瞬時轉染及蛋白表達。

PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit適用范圍：HEK293細胞懸浮培養、其他HEK293細胞的高密度懸浮培養、DNA瞬時轉染及蛋白表達。

該試劑盒包括下列試劑：

（1）PolyTool™ 293 Transfection Reagent （懸浮293細胞轉染試劑）；

（2）PolyTool™ 293 Medium（化學限定293 細胞無血清細胞培養液）；

（3）PolyTool™ 293 B（化學成分限定的、高濃度營養成分的補料 1）；

（4）PolyTool™ 293 C（化學成分限定的、高濃度營養成分的補料 2）。

PolyTool™ 293 Transfection Reagent 配合PolyTool™ 293 Medium、PolyTool™ 293 B及PolyTool™ 293 C使用，可大幅度提高重組蛋白的表達產量。

二、操作流程

1.細胞接種（以25mL體系為例）：

根據細胞狀態，選擇合適的接種密度，建議接種密度為 1×10⁶ cells/mL，待第二天細胞密度達到2×10⁶ cells/mL左右，活性大于95%時進行轉染。

2.瞬時轉染：

建議質粒（μg）與試劑（μL）參考配比區間為1:3~1:5之間。具體步驟如圖1所示（以1:4為例）：

（1）使用本樣品前渦旋混勻5秒，使用1.25 mLPolyTool™ 293 Medium稀釋100 μL的轉染試劑，并吹打均勻；

（2）使用1.25 mL PolyTool™ 293 Medium稀釋25 μg質粒，并吹打混勻；

（3）將(1)和(2)所述溶液混合均勻；

（4）將(3)所述混合溶液室溫靜置孵育10~15 min；

（5）將(4)中的復合物溶液加入25 mL的細胞培養體系中，放回搖床中，在37 ℃、震蕩速度120 rpm下繼續培養。

3.產物表達與檢測：

（1）轉染24小時、72小時、120小時、168小時后加入3%（75 mL/100mL）PolyTool™293 B，0.3%（75 μL/25 mL）PolyTool™ 293 C。

（2）轉染后第5~7天測定產物表達量。多數蛋白的合成在轉染后第5天左右可達到最高值，客戶可根據細胞狀態及表達量選擇適宜的收獲時間。

圖1 細胞轉染示意圖

293細胞專用轉染試劑盒——PolyTool™ 293-Fit Transfection Reagent Kit代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津經濟技術開發區。公司產品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向，專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產品銷售，經營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我們提供質優價美的產品、及時到位的服務，努力成長為生命科學和生物技術企業的優質供應商。