詳細介紹
參數規格:
產品貨號:FS-P013554
產品規格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 人胞漿球蛋白Multi-class antibodies: 48T
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Cy5 Cy5標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2 96T
NUMBL 膜相關蛋白樣蛋白NUMBL抗體 0.2ml
Phospho-BTK (Tyr223) 磷化蛋白酪激ATK抗體 0.1ml
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內皮1Multi-class antibodies: 48T
LRIG1 LRIG1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLF8/KLF3 KLF樣轉錄因子8抗體 0.1ml
dDAVP(Human Desmoin/1-desamino-8-D-arginine vasopressin) ELISA Kit 人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓 96T
Prostaglandin E Receptor EP2 前列腺E2受體2抗體 0.2ml
CKAP4 細胞骨架相關蛋白4抗體 0.2ml
LRIG1 LRIG1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GIT2 G蛋白偶聯受體激相互作用蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASAM/ACAM 脂肪細胞特異性粘附分子抗體 0.1ml
IAA/FITC 熒光標記吲哚-3-乙抗體/植物生長單克隆抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgM 0.1ml
P-AKT1/PKB1/2/3(pSer473) /FITC 熒光標記磷化蛋白激B(pSer473)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
剛果嗜皮菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 666生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
瘦果紅酵母種屬: Rhodotorula│acheniorum分離基物: fruit of Fragaria vesca (strawberry)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│sp.分離基物: 鹽湖土壤樣品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分類學及嗜鹽微生物其它方面的研究培養基: 38生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus│pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 性蛋白培養基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒甲異酯 97%2,4-二 98%間二甲氨基酚(>97%,BR)
α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒 98%(劇品)2-巰基并噁唑 98%3-(氧硅基)甲基烯酯(>98%,BR)
α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒甲酯 98%直接紅80 AR3,4,5-氧基(>98%,BR)
α1微球蛋白(MGα1)ELISA試劑盒二 Standard for GC,>99.8%(T)間乙酮 98%3,4,5-氧基肉桂(>98%,BR)
α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒二 AR,99.5%辛二 99%藜蘆(>99%,BR)
α1抗胰糜蛋白(AACT)ELISA試劑盒二 CP,98%2,2,6,6-四甲基-1-氧基 98%3,5-二羥基甲(>98%,BR)
α1抗胰蛋白(α1-AT)ELISA試劑盒二 分析標準品5-氟尿嘧啶 99%3-溴噻吩(>95%,BR)
α1防御(DEFA1)ELISA試劑盒疊氮二酯 97% 二酰 98%3-溴(BR)
α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒疊氮基基硅 93%氟硅銨 CP3-甲(>99%,BR)
α/β干擾受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒3- 98%六氟鈦,溶液 50%溶液3-氟甲(>98%,BR)
Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)ELISA試劑盒異磺酰酯 98%2-溴間二甲 97%3-羥基甲(>98%,BR)
XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒三聚 99%溴乙芐酯 96%間羥基肉桂(>98%,BR)
Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒1,3-二氨基胍鹽鹽 97%溴乙 CP,98.0%3-甲(>98%,BR)
v-rel禽網狀內皮過多癥病癌基因同源物B(RelB)ELISA試劑盒基氫鈉 95%溴乙 AR,98.5%(GC)3-甲(>98%,BR)
vav3鳥核苷交換因子(VAV3)ELISA試劑盒二鈉 96%溴乙 分析標準品3-基磺鈉(>98%,BR)
UV切除修復蛋白RAD23同源物A(RAD23A)ELISA試劑盒基氫鈉 1.0 M in THF溴乙 Standard for GC,≥99.5% (GC)3-甲(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。