詳細介紹
參數規格:
產品名稱:利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒
產品貨號:FS-P013458
產品規格: 50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人轉錄因子Tbx3 ELISA試劑盒Multi-class antibodies: 96T
SSTR5 生長抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗人IgG 0.3ml
Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 96T
C9orf156 9號染色體開放閱讀框156抗體 0.1ml
BATF B細胞轉錄激活因子抗體 0.1ml
SSTR5 生長抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產物Multi-class antibodies: 48T
phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HABP2 透明質結合蛋白2抗體 0.2ml
HSP-70 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白70 96T
PTEN 一種抑制基因抗體(C端) 0.1ml
BAI1 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體 0.2ml
phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/Bio 生物標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GALR1 甘丙肽受體1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOC3 載脂蛋白C3抗體 0.2ml
gp130/IL-6R /FITC 熒光標記白介-6受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
prox-1 /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 飼料培養基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
海氏腸球菌種屬: Enterococcus│hirae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養基: 0214生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
海沈氏菌種屬: Shimia│marina分離基物: 生物樣/生物膜提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株;產微生物/硝鹽還原培養基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
小克銀漢霉種屬: Cunninghamella│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
硫類肝(HS/HPS)ELISA試劑盒鋅粒 99.99% metals basis亞鐵化鈉 CP5'-三腺苷(ATP)
硫類肝(HS)ELISA試劑盒超純鋅粒 棒狀,99.9999% metals basis原甲酯 98%布林佐
硫角質(KS)ELISA試劑盒鋅 99.999% metals basis原甲三乙酯 99%布林佐(標準品)
硫雌酮(E1S)ELISA試劑盒鋅粒 SP氟化銨 AR,98%羅硝唑
硫S-甲基轉換(TPMT)ELISA試劑盒雙環己酮草酰二腙 AR氟化銨 GR,98%羅硝唑(標準品)
硫化氫(H2S)ELISA試劑盒二乙酰一肟 AR氟化氫銨 AR,98.5% 屈膦二鈉四合物
鱗狀癌相關抗原(SCCAg)ELISA試劑盒間甲基紅 Indicator氫氟 AR,40.0%乙基纖維
鱗狀癌抗原1(SCCAg1)ELISA試劑盒米氏酮 98%氟 AR,40.0%維生 K1
鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒4-硝基 CP氟 CP,40.0%9-氨基米諾環鹽鹽
酯酰肌特異性酯C(PIPLC)ELISA試劑盒4-硝基 98%氟 49.5-50.5%溶液阿法替尼
酯Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒硝氮黃 Indicator氨基胍碳氫鹽 98.5%阿扎那韋硫鹽
酯C(PLC)ELISA試劑盒乙基黃原 AR,95%三氧化二銻 99.99% metals basis阿扎那韋硫鹽(標準品)
脂轉運蛋白(PLTP)ELISA試劑盒酯 ≥99%, FCC三氧化二銻 AR,99.5%亞培南-西司他丁鈉
脂轉移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒酯 98%重去甲腎上腺 ≥98%(HPLC),USP長春西丁,長春西汀
脂酰乙(PEth)ELISA試劑盒酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)L-去甲腎上腺 98%妥英鈉
脂酰絲氨(PS)ELISA試劑盒月桂鈉 98%辛弗林 98%奧卡西平
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。