詳細介紹
參數規格:
產品貨號:FS-P013536
產品規格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
LAG-3/CD223/FITC 熒光標記細胞活化基因-3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SOD1/FITC 熒光標記超氧化物歧化1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1A1 乙醇脫氫1抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗馬IgG 0.1ml
Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) 磷化糖皮質受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SOD1/FITC 熒光標記超氧化物歧化1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯Multi-class antibodies: 48T
MMP-10 基質金屬蛋白-10抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 5 整合β5抗體 0.1ml
RV(Human rabies virus antibody) ELISA Kit 人抗狂犬病毒抗體 96T
Proteasome 20S alpha 6 蛋白體PSMα6抗體 0.2ml
C7orf64 7號染色體開放閱讀框64抗體 0.2ml
MMP-10 基質金屬蛋白-10抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗人IgG 0.1ml
GBP6 G蛋白結合蛋白6體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSA 芳香基酯1抗體 0.2ml
IFABP/FITC 熒光標記小腸型脂肪結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/FITC FITC標記的兔抗猴IgG 0.3ml
PKR/FITC 熒光標記蛋白激R/雙鏈RNA依賴蛋白激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
細小病毒B19 染料法熒光定量PCR試劑盒50次蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
施氏葡萄球菌凝集亞種種屬: Staphylococcusschleiferisubsp.coagulans分離基物: Canineexternalearotitis安全等級: 1模式菌株: yes生長條件: 37℃
豌豆根瘤菌種屬: Rhizobiumlegumiunosarum(Frank)Frank安全等級: 1模式菌株: no培養基: 9生長條件: 25-28℃
穗產色鏈霉菌種屬: Streptomyces│racemochromogenes提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: Type strain. Produces racemomycine complex, strept培養基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
胞漿型脂A2(cPLA2)ELISA試劑盒3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-1-磺 98%吡啶-3,4-二羧 98%次硝鉍(>98%,BR)
胞漿球蛋白(CIg)ELISA試劑盒2-環己基乙磺 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二甲 97%碳酐>3000U/mg
伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒4--7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑 98%4-甲磺酰異酯 96%羧肽 B >170 U/mg
半乳糖凝集7(Gal-7)ELISA試劑盒9,9-二甲基-2,7-二溴芴 98%2-(三乙酰)吡咯 99%碳鈷(II)(>98~102%,BR)
半乳糖凝集3(Galectin3)ELISA試劑盒二硫蘇糖 99%鹽多巴 98%硝銅三(>99%,BR)
半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于分子生物學, ≥99%(±)-α-煙酚2'-脫氧脫氧胸苷-5'二三鈉鹽
半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二 CP,99.0%半乳糖氧化(活:> 30 U/mg,BC)
半胱氨蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)ELISA試劑盒1,8-二氮-9-芴酮 99%碳胍 99%3-吲哚(>99%,植物級)
板層相關多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒N,N'-二環己基-4-嗎啉脒 98%異抗壞血鈉 98%草亞鐵二(>99%,BR)
瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒DNA ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP硝鑭六(>99%,BR)
白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯 99%三氧化二銻 99.99% metals basis化鉛(>99%,BR)
白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯 97%三氧化二銻 AR,99.5%檸檬鋰四(>98%,BR)
白酯(LE)ELISA試劑盒2,7-二溴芴酮 96%三氧化二銻 99.9%,平均粒徑:0.7 µm4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷
白調節(LR)ELISA試劑盒2,6-二酚靛鈉鹽 AR三氧化二銻 99.999% metals basis4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖苷
白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒3,5-二-2-羥基磺鈉 99%三氧化二銻 CP,99%4-甲基傘花基鈉三
白抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒 3,3'-二氨基聯四鹽鹽合物 98%β-氨乙酯鹽鹽 98%萘(>98%,BC)