詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品貨號:FS-P013545
產品規(guī)格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Socs 2/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B10 糖還原相關蛋白質抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/FITC FITC標記的兔抗馬IgG 0.3ml
Gamma catenin γ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG 兔抗豚鼠IgG 1mg
Socs 2/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺Multi-class antibodies: 48T
MMP-11 基質金屬蛋白-11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 3/CD61 整合β3抗體 0.1ml
EHF(Human epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM 96T
Proteasome 20S alpha 2 蛋白體PSMα2抗體 0.2ml
C7orf59 7號染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml
MMP-11 基質金屬蛋白-11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/APC APC標記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAT 基合成抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSK 芳香基酯K抗體 0.2ml
IDE/FITC 熒光標記胰島降解抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗猴IgG 0.1ml
PKC delta/FITC 熒光標記蛋白激C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
乳酸桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次運動發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis分離基物: 腐爛果提供形式: 凍結物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產酒精培養(yǎng)基: 177生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
海洋海棲菌種屬: Oceanicola│marinus分離基物: 樣/海提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株;培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
產氣腸桿菌種屬: Enterobacter│aerogenes提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分類學研究,質量控制培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 36℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
白介1受體相關激1(IRAK1)ELISA試劑盒鹽吡哆 99%4,4'-二(9-咔唑)聯(lián) 98%氫鈣二(>98%,BR)
白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒1,4-哌二乙磺二鈉鹽 BC2,5-二(甲基)- 1-甲氧基-4- (2-乙基已氧基)- 98%碳鈰
白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒1,4-哌二乙磺倍半鈉鹽 99%2-溴-9-芴酮 96%胰凝乳蛋白原 A
白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒并五 98%9,9-二辛基-2,7-二溴基芴 97%汽巴藍
白介1β轉換(ICE)ELISA試劑盒 對二鈉 六合物 培養(yǎng)級, ≥98%9,9-二己基-2,7-二溴芴 97%DEAE葡聚糖
白介1β前體(Pro-IL-1β)ELISA試劑盒對二鈉 for enzyme immunoassay,≥99.0%3-癸基噻吩 98%氟啶酮(>98%,植物級)
白介1β前體(pro-IL1B)ELISA試劑盒鈉 AR,98.0% 9,9-二甲基-2,7-二溴芴 98%組(>98%,BC)
白介1β(IL-1β)ELISA試劑盒磺二甲氧嘧啶 98%2,7-二溴芴 98%海
白介1α(IL-1α)ELISA試劑盒D-(+)-海藻糖 二合物 from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%2,6-二甲基-γ-吡喃酮 99%麥芽化, 硫銨懸浮液
白介1Rα(IL-1Rα)ELISA試劑盒三(羥甲基)甲基甘氨 99%2,7-二溴芴酮 96%草酮(>95%,植物級)
白介19(IL-19)ELISA試劑盒三(羥甲基)甲基甘氨 99.5%2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二 98%4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷
白介18結合蛋白(IL-18BP)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) 98%3-己基噻吩 98%粘(>98%,BC)
白介18(IL-18)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) ≥99%(HPLC)2-甲氧基-5-(2′-乙基已氧基)對二甲 98%N,N-二乙基對二硫鹽
白介17F(IL-17F)ELISA試劑盒3,3′,5,5′-四甲基聯(lián) standard for GC, ≥99.0% (GC)N,N′-二基-N,N′-(1-萘基)-1,1′-聯(lián)-4,4′-二(NPD) 99.萘酚AS-MX酯(>98%,BC)
白介17B(IL17B)ELISA試劑盒Tris乙磺 99%3-辛基噻吩 98%肼(>98%,BC)
白介17A(IL-17A)ELISA試劑盒三(羥甲基)氨鹽鹽 99%6,13-五并醌 99%硫氫(> 99%,BC)