詳細介紹
參數規格:
產品貨號:FS-P013515
產品規格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發動蛋白2Multi-class antibodies: 48T
SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Cyt-C ELISA Kit 大鼠 96T
NIT2 NIT2蛋白抗體 0.2ml
BACE2 β淀粉樣前體蛋白裂解2抗體 0.2ml
SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護Multi-class antibodies: 48T
Mre11/HNGS1 DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin Alpha V 整合αV抗體 0.2ml
HBcAb-IgM(Human hepatitis B virus core IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體 96T
PRPF4 PRPF4蛋白抗體 0.2ml
CEA 癌胚抗原抗體 0.1ml
Mre11/HNGS1 DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗貂IgG 0.1ml
phospho-GABBR2 (Ser884) 磷化G基丁B型受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ARIP2B 激活受體2B抗體 0.2ml
IGFBP-2/FITC 熒光標記胰島樣生長因子結合蛋白-2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLGF/FITC 熒光標記小鼠胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用RT-PCR試劑盒外來毛霉種屬: Mucor│adventitius分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 192生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
淺灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│griseolus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: BacilluscereusFranklandandFrankland安全等級: 1模式菌株: no培養基: 2生長條件: 30℃
陰溝腸桿菌種屬: Enterobacter│cloacae分離基物: 野生稻莖提供形式: 斜面培養物模式菌株: no應用領域: 研究培養基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
非小肺癌相關抗原211(CA211)ELISA試劑盒D-別蘇氨 99%迷迭香 97%醋鋰,二(AR)
非小肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒D-酪氨 98%雷帕霉 分析標準品,≥98%聚蔗糖400
非神經元性烯化(NNE)ELISA試劑盒DL-色氨 99%雷帕霉 98%二硝基楊
非甲基化寡核苷(NON)ELISA試劑盒D-色氨 98%酯蟾配基 分析標準品,≥98%二鈉
芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒DL-酪氨 98%紅景天苷 分析標準品,≥97.5%(HPLC)二氫鈉二
泛連接(E3/UBPL)ELISA試劑盒D-纈氨 98%柴胡皂苷A 分析標準品,≥98%二(AR)
泛結合(E2/UBCE)ELISA試劑盒D-纈氨乙酯鹽鹽 98%柴胡皂苷D 分析標準品,≥98%化錳四
泛激活(E1/UBAE)ELISA試劑盒DL-纈氨 98%菝葜皂苷元 分析標準品,≥98%烯葡聚糖凝膠S-100 HR
泛分解(DUB)ELISA試劑盒L-纈氨甲酯鹽鹽 99%斯皮諾 分析標準品,≥97%烯葡聚糖凝膠S-200 HR
泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒環羧 98%飛薊寧 分析標準品,≥98% 烯葡聚糖凝膠S-300 HR
泛蛋白(Ub)ELISA試劑盒吡咯 99%飛薊亭 分析標準品,≥98% 烯葡聚糖凝膠S-400 HR
反狀腺原氨(rT3)ELISA試劑盒1-四氫萘酮 97%西羅莫司 分析標準品,≥98%烯葡聚糖凝膠S-500 HR
法尼基二法尼基轉移1(FDFT1)ELISA試劑盒鎢銨 99.99% (metals basis)茵芋苷 分析標準品,≥98%干酪
法尼X受體(FXR)ELISA試劑盒鎢銨 AR,99%知母皂苷元 分析標準品,≥98% 化鋅
發動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒仲鎢銨 99.95 %千金藤啶 分析標準品,≥98%醫用凡士林
二酰基甘油(DAG/DG)ELISA試劑盒鉬銨,四 AR五味子 分析標準品,≥98%原釩鈉