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總的來(lái)說(shuō),國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,如Gibco 16000,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
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PAAA15-151優(yōu)級(jí)胎牛血清
PAA A15-151 優(yōu)級(jí)胎牛血清 500ml Fetal Bovine Serum Gold
、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
9、 細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
(2) 培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。
10、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?
來(lái)源不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
胎牛血清,小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別:
這三種血清的成份,總體沒(méi)有什么明顯差別,只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān),如上述有人說(shuō)的抗體等很少。此外,因生長(zhǎng)發(fā)育的需要,有些成分在小牛出生后會(huì)發(fā)生一些變化。不過(guò)還沒(méi)有搞清楚它與其它的血清之間的差別。有一點(diǎn)可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。
PAAA15-151優(yōu)級(jí)胎牛血清
胎牛本身生活在一個(gè)潔凈環(huán)境當(dāng)中,其血清與外界隔絕,只要生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范,其質(zhì)量肯定要新生牛和小牛要好。
血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問(wèn)題。
胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少。
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