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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/48樣 |
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貨號 | GOY-01S6573 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
產品名稱:丙酮酸脫氫酶(PDH)可見分光光度法測試盒
規格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6573
分類:三羧酸循環系列
商品介紹:
PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循環連接起來。
測定原理
PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產生黃色物質,從而導致450nm光吸收的增加。
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體 免疫球蛋白D重鏈保守區抗體
內皮素1抗體 免疫球蛋白A誘導同源蛋白抗體
蝮蛇蛇毒蛋白抗體 免疫球蛋白A Fc段受體1抗體
表皮生長因子受體底物8抗體 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體
早期生長應答蛋白1抗體 泌乳素受體抗體
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉移酶(PFP)測試盒
酵母RNA提取試劑盒 50次
酵母蛋白裂解液100ml
酵母蛋白裂解液25ml
酵母蛋白裂解液50ml
丙酮酸脫氫酶(PDH)可見分光光度法測試盒發根土壤桿菌(發根植物單胞菌) 紅曲霉菌
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillusthuringiensissubsp.galleriae 里氏木霉
杏鮑菇 木耳
遲緩愛德華氏菌 表面培養基60mm/25cm2
陰溝腸桿菌 蒼白芽孢桿菌
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