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小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1G5圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1G5圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
大鼠雄激試劑盒規格型號:96T/48T大鼠雄激試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠雄激試劑盒、大鼠雄激eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠血小板活化試劑盒規格型號:96T/48T大鼠血小板活化試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠血小板活化試劑盒、大鼠血小板活化eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠氧化低密度脂試劑盒規格型號:96T/48T大鼠氧化低密度脂試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠氧化低密度脂試劑盒、大鼠氧化低密度脂eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
蓖麻凝集試劑盒規格型號:96T/48T蓖麻凝集試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:蓖麻凝集試劑盒、蓖麻凝集eisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
大鼠正常T細胞表達和分泌試劑盒規格型號:96T/48T大鼠正常T細胞表達和分泌試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:大鼠正常T細胞表達和分泌試劑盒、大鼠正常T細胞表達和分泌elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人β乳球試劑盒規格型號:96T/48T人β乳球試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人β乳球試劑盒、人β乳球elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。
人Toll樣受體9試劑盒規格型號:96T/48T人Toll樣受體9試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人Toll樣受體9試劑盒、人Toll樣受體9elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質期:6個月。氟化 CAS7681-49-4 25g
Tricine-SDS-PAGE 配膠液 81225-250 250mL
200mL 自誘導培養基 (lac 啟動子 )
10g 羅丹明 B
1 g 糜蛋白酶原
100 次 超氧化物試劑盒
己糖激酶 CAS9001-51-8 2.5KU
山羊抗兔 IgG,熒光素 488 標記 131158-0.1 0.1mg
天凈沙細胞蛋白質 -RNA 雙提取試劑盒 130829-50 50 次
25g N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸
100mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷
5mL 髓核細胞生長因子
0.1gx10 電泳過硫酸銨
星形膠質細胞生長因子 21-0400-5 5mL
RNA SDS( 十二烷基硫酸 ) 90710-100 100g
60U Poly(U) 聚合酶
0.1mL×10 BL21(DE3)pLysS 化學感受態細胞
100mg Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 )
50 次 痰液 DNAout
Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 ) 23-0520-5 5mg
溶壁酶干粉 100932-1 1g
50mL RNA 洗脫液
0.032μg 腸激酶 ( 輕鏈 )
10mL 非酶多糖清除劑 (RNA )
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