PE8898 ECL Plus超敏發光液 顯色與信號檢測
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 PE8898
- 產地 北京
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/3/18 16:35:58
- 訪問次數 8
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 2*12.5ml /2*50ml /250ml*2 |
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貨號 | PE8898 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,制藥 |
主要用途 | 用于HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交。 |
諾博萊德 ECL Plus超敏發光液,ECL超敏發光液,ECL發光液,ECL Western Blotting Substrate
ECL Plus超敏發光液 顯色與信號檢測
產品貨號:PE8898
產品名稱:ECL Plus超敏發光液,ECL超敏發光液,ECL發光液,ECL Western Blotting Substrate
產品規格:2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2
產品簡介:
別名:ECL超敏發光液 ECL發光液
英文名稱:ECL Western Blotting Substrate
中文名稱:ECL Plus超敏發光液
規格:2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2
儲存條件:2-8℃,avoid light,1 year
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品介紹
NobleRyder PE8898 ECL Plus超敏發光液,ECL超敏發光液,ECL發光液,ECL Western Blotting Substrate直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關聯的蛋白或核酸底物。這一du特的發光底物系統是目前zui靈敏的商業化熒光ECL檢測試劑,具有ji高靈敏度和高信噪比,發光迅速,熒光可使X感光膠片感光達12小時以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測。同時該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(1:2000-1:10000),極其節省抗體。
ECL Plus級發光液,是一種可廣泛應用于免疫學實驗的化學發光試劑。實驗效果優于市面上某zhiming品牌的超敏級發光液。
ECL Plus超敏發光液與辣根過氧化物酶進行反應,產生熒光,可以通過膠片和相對應的儀器進行信號收集。
ECL Plus靈敏度ji高,是市面上普通DAB的1000倍以上,在western實驗中,HRP標記的抗體(1mg/ml)能達到10萬級稀釋,是某品牌的2-5倍左右。ji高的靈敏度可以讓及大幅度的節省抗體成為可能,在這種情況下需要降低一抗或者二抗的稀釋度,避免得到的是過暗的條帶,難以比較。
ECL Plus超敏發光液發光時間長,將兔的IgG制備成蛋白上樣樣品,進行正常的免疫印跡實驗(上面提到的都是這種情況情況下的稀釋度,斑點試驗的稀釋度會更高),在化學發光拍照儀器上進行信號收集,在20分鐘后,熒光強度與初始的熒光強度基本無變化,30分鐘后二抗濃度高的熒光稍有衰減,其他的基本沒有變化。
用途:用于HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交。
安全性:無特殊毒性,按普通化學品處理。
使用方法(僅供參考):
1. 常規電泳、轉膜、HRP 標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用 HRP 標記 IgG 或用一抗-鏈親 和素-生wu素-HRP 夾心法。核酸雜交膜用 HRP 標記探針雜交,洗膜。
2. 在洗滌膜上的 HRP 標記二抗的同時,新鮮配制發光工作液:分別取等體積的溶液 A 和 B 混合, 放置使之恢復室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但 靈敏度略有減低。
3. 用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜wan全干燥。將膜wan全浸入并與發光工作液充分接觸(約 0.125mL 發光工作液/cm2膜)。室溫孵育 3 分鐘后立即壓片曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導致曝光條帶異常。發光過程的本質是酶促反應,使用過少的發光工作液不利于反應進行,也會導致膜上條帶曝光不均勻和靈敏度明顯降低。為達節約目的可將膜剪小但勿降低發光液用量。
4. 用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發光工作液。但勿洗去發光液。
5. 在 X 光膠片暗盒內面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將雜交膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來wan全包裹雜交膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。 用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內,最好蛋白帶面向上。
6. 在黑暗中放入 X 感光膠片,分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘。顯影沖洗。
注意事項:
1. 步驟 1-5 可在日光燈下操作;但發光液暴露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免。戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的潔凈。
2. 長時間曝光或蛋白質過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶模糊。
3. 發光工作液孵育約 3 分鐘后膜上的條帶發光。強條帶發光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶 發光較弱,肉眼雖不可見但能使 X 膠片曝光。不能單憑肉眼觀察判斷條帶發光時間。肉眼不可見的熒光實際上可持續數小時并使 X 膠片感光,因而弱帶可曝光 1-10 小時。如果曝光后條帶不 佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 發光和曝光。
4. 由于超敏發光液的高靈敏度,強烈推薦大多數進口抗體起始濃度為一抗 1:1000-1:4000,二抗 1:2000-1:5000。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導致失敗!
5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒光,應選擇高質量保鮮膜,例如“克林萊”牌保鮮膜。
6. 使用肉眼可見的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可幫助確定膠片上條帶的準確 位置和大小。
7. NaN3 能抑制 HRP 活性,回收二抗時應避免使用 NaN3,如必需使用勿超過 0.01%。
ECL Plus超敏發光液 顯色與信號檢測
產品訂購信息:
NobleRyder PE8898 ECL Plus超敏發光液,ECL超敏發光液,ECL發光液,ECL Western Blotting Substrate 2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2