D1648 革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) D1648
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/3/17 17:55:28
- 訪問次數(shù) 11
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/100T |
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貨號(hào) | D1648 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
主要用途 | 可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。 |
諾博萊德 革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒
革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
產(chǎn)品貨號(hào):D1648
產(chǎn)品名稱:革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品簡介:
儲(chǔ)存條件:酶附件-20℃,其它試劑RT,復(fù)檢期1年
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyderD9438 革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合 DNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),提取革蘭氏陽性菌基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司te有新型材料,能夠高效專一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。
操作步驟(僅供參考):
使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽(每瓶需要單獨(dú)加入45mL無水乙醇)。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。
1、取細(xì)菌培養(yǎng)液1mL,12000rpm離心1min.,盡量吸除上清。
2、向菌體中加入200μL溶液A,振蕩或用移液器吹打使菌體充分懸浮,隨后加入50μL溶jun酶,37℃處理30min以上。(如果需要去除RNA,可加入2μL RNase A溶液)。
3、向管中加入20μL的蛋白酶K,充分混勻,55℃消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化wan全為止,此時(shí)可見菌液呈清亮粘稠狀。
4、向管中加入200μL溶液B,充分顛倒混勻,如出現(xiàn)白色沉淀,可于75℃放置15-30min,沉淀即會(huì)消失,不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果溶液未變清亮,說明樣品消化不che底,可能會(huì)導(dǎo)致DNA的提取量以及純度降低,還可能堵塞吸附柱。
5、向管中加入200μL無水乙醇,充分混勻,此時(shí)還可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入到吸附柱中,靜置2min。
6、12000rpm 離心2min. 棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
7、 向吸附柱中加入 600μL 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否己加入無水乙醇)。12000rpm 離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入600μL漂洗液, 12000rpm離心l min, 棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
9、12000rpm 離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。
10、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50-200μL 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。
11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心2 min,即可得到高質(zhì)量的細(xì)菌基因組DNA。
注意事項(xiàng):
1. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量下降。
2. 若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響提取效果。
3. 如果實(shí)驗(yàn)中的離心步驟出現(xiàn)柱子堵塞的情況,可適當(dāng)延長離心時(shí)間。
4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL,體積過小會(huì)影響回收效率;洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍), pH值低于7. 0會(huì)降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
5. DNA 濃度及純度檢測(cè):得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1.0相當(dāng)于大約50μg/mL雙鏈DNA、40μg/mL 單鏈DNA。OD260/0D280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。
革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
產(chǎn)品訂購信息
D9438 革蘭氏陽性菌基因組DNA提qu試劑盒 50T/100T