D0988 通用基因組DNA提qu試劑盒 質粒提取
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 D0988
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/3/17 17:47:30
- 訪問次數 17
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/100T |
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貨號 | D0988 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,制藥 |
主要用途 | 適合于從土壤,糞便,昆蟲,以及其他樣本中提取基因組DNA。 |
諾博萊德 通用基因組DNA提qu試劑盒
通用基因組DNA提qu試劑盒 質粒提取
產品貨號:D0988
產品名稱:通用基因組DNA提qu試劑盒 Universal Genomic DNA Extraction Kit
英文名稱:Universal Genomic DNA Extraction Kit
產品規格:50T/100T
產品簡介:
儲存條件:酶附件-20℃,其它試劑RT,復檢期1年
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
NobleRyderD0988 通用基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒為通用型,適合于從土壤,糞便,昆蟲,以及其他樣本中提取基因組DNA。對細菌,真菌,昆蟲等樣本都具有很好的裂解效果,最大限度的保留了生物DNA的多態性。
使用本試劑盒提取的DNA產量大、完整性好,可直接用于各種常規操作,包括酶切、PCR 、文庫構建、Southern 雜交等實驗。
操作步驟(僅供參考):
* 使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽(每瓶需單獨加入 45mL 無水乙醇)。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、樣品處理:
1)土壤:稱取0.1-0.3 g (根據干濕)土壤,放入研缽中,倒入適量的液氮,立即研磨,重復3 次,使土壤顆粒研成粉末,加500 μL溶液A,振蕩至che底懸浮。
2)糞便:稱取0.1-0.3 g (根據干濕) 糞便,加500 μL溶液A,振蕩至che底懸浮。
3)昆蟲:稱取0.1-0.3 g 昆蟲,倒入適量的液氮,立即研磨,重復3次,使昆蟲研成粉末,加500 μL溶液A,振蕩至che底懸浮。
4)未知樣品,如為細未狀,可直接稱取0.1-0.3 g(根據干濕)加500 μL溶液A,如為塊狀,可0.1-0.3 g 用液氮研磨成粉未,再加500 μL溶液A,振蕩至che底懸浮。
2、向懸浮液中加入2 μL RNase A,55℃放置10 min。
3、加入20 μL的蛋bai酶K,充分混勻,55℃水浴消化,30 min。消化期間可顛倒離心管混勻數次,12000轉離心10 min。將上清轉移到一個新的離心管中。如有沉淀,可再次離心。
4、加入500 μL溶液B,充分混勻。如出現白色沉淀,于55℃放置5 min,沉淀即會消失,不影響后續實驗。如溶液未變清亮,說明樣品消化不che底,可能導致提取的DNA量少及不純,還有可能導致上柱后堵柱子,請增加消化時間。
5、加入500 μL無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,放置2 min (分兩次加入,每次700 μL)。
6、12000 rpm 離心2 min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入600 μL漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000 rpm離心1 min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入600 μL漂洗液,12000 rpm離心1 min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中
9、12000 rpm 離心 2 min,將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。
10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加50-200 μL經65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置5 min,12000 rpm離心2 min。
11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置2 min,12000 rpm離心2 min,即可得到高質量的基因組DNA。
注意事項:
1、由于樣品不同,最終提取的DNA含量和純度也有所不同,一般來說,如果所提取DNA用電泳的方法檢測不到,PCR會有結果,樣品盡可能的新鮮。否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
2、若試劑盒中的溶液出現沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響提取效果。
3、如果樣品消化不che底,后面的離心步驟中可能會出現堵柱子的情況,可適當延長離心時間。
4、洗脫緩沖液的體積最好不少于50 μL,體積過小會影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率;DNA產物應保存在-20℃,以防DNA降解。
5、DNA 濃度及純度檢測(濃度較高時):得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰, OD260值為 1 相當于大約 50 μg/ mL 雙鏈 DNA、40 μg/ mL 單鏈 DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
通用基因組DNA提qu試劑盒 質粒提取
產品訂購信息
D0988 通用基因組DNA提qu試劑盒 Universal Genomic DNA Extraction Kit 50T/100T