化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>生命科學(xué)儀器>細(xì)胞培養(yǎng)儀器>細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)>IML-080 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記
IML-080 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 南京賽泓瑞生物科技有限公司
- 品牌 上海淳麥
- 型號(hào) IML-080
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/27 9:13:57
- 訪問(wèn)次數(shù) 285
產(chǎn)品標(biāo)簽
人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
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一、人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱 | Daudi-LUC-eGFP-puro(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記)(STR鑒定正確) | |||
細(xì)胞別稱 | Daudi-LUC-eGFP-puro;人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-LUC-eGFP-puro | |||
種屬來(lái)源 | 人 | |||
組織來(lái)源 | 外周血 | |||
生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) | |||
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞 | |||
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
背景介紹 | Luciferase Daudi細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持。可用作螢光蛋白活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。 該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。 1967年五月E. Klein and G. Klein從一位16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立了Daudi細(xì)胞株。 表面免疫球蛋白陽(yáng)性(sIg+)。Β2-微球蛋白陰性,EBNA陽(yáng)性,并有衣殼抗原VCA。細(xì)胞株攜帶EB病毒。 Daudi是典型的B淋巴母細(xì)胞,廣泛應(yīng)用于白血病發(fā)生機(jī)理的研究。 | |||
puro藥篩濃度 | Daudi-LUC-eGFP細(xì)胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml,培養(yǎng)過(guò)程中可不用再添加puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低,可定期用0.2ug/ml濃度puro維持 | |||
生物安全等級(jí) | 2 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測(cè) | 無(wú) | |||
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CCL-213 BCRC; 60192 Coriell; GM03190 Coriell; GM17346 DSMZ; ACC-78 ECACC; ECACC; 94071449 | |||
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞貨期 | 2周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說(shuō)明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 | |||
二、人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 c、按6-8 mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 d、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 | 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 | ||
注意事項(xiàng) | 1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。 | 1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存; 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 | |||
備注:客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何技術(shù)問(wèn)題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時(shí)給予解答。 | ||||
三、人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記細(xì)胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 | |||
四、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開(kāi)封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問(wèn)題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開(kāi)封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā); 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的,不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |
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