來源：Quanterix生物技術

通過超靈敏免疫測定法測定血漿中蘇氨酸217磷酸化tau（p-tau217）已被證明是阿爾茨海默病（AD）的最佳生物標志物。本研究旨在確定中國人血漿p-tau217的參考區間，并評估其對AD的診斷價值。我們招募了150名認知功能未受損（CU）的個體、60名AD癡呆患者、30名AD導致的輕度認知功能障礙（MCI）患者、40名額葉變性（FTLD）患者和70名皮層下缺血性血管性癡呆（SIVD）患者。使用單分子陣列測量血漿中p-tau217、總tau、淀粉樣β（Aβ）42和Aβ40的濃度。血漿p-tau217在鑒別AD患者與CU對照組、FTLD患者和SIVD患者（AUC = 0.983、0.936、0.892）以及鑒別MCI患者與CU對照組（AUC = 0.943）方面優于其他生物標記物。血漿p-tau217水平與有癥狀的AD患者的記憶力呈負相關。在中國人群中，血漿p-tau217對AD的診斷準確性非常高，即使是在早期階段。

期刊：The Journal of Prevention of Alzheimer's Disease

2025年2月

研究機構：天津醫科大學總醫院，天津金域醫學檢驗實驗室

研究背景

阿爾茨海默病（AD）的發病率不斷上升，預計到2050年將有超過1億人罹患該病，這已成為一項重大的全球性挑戰，并對社會和醫療機構構成嚴重威脅。基于血液的生物標志物在篩查、早期診斷、跟蹤進展以及最終監測AD治療效果方面具有很大的潛力。與其他血漿生物標記物相比，血漿p-tau蛋白（通常采用超靈敏免疫測定法，如單分子陣列（Simoa®）進行測量）在鑒別由CSF或PET生物標記物或尸檢結果支持診斷的AD患者方面表現最佳。在各種p-tau蛋白中，蘇氨酸217處磷酸化的tau（p-tau217）在區分注意力缺失癥患者和其他神經退行性疾病患者以及在輕度認知障礙（MCI）階段檢測注意力缺失癥病理方面具有最大的潛力，p-tau217在AD的臨床前期和有癥狀階段都會隨著時間的推移出現顯著的淀粉樣蛋白依賴性變化，并且與AD臨床前期的臨床惡化和腦相關。

Simoa®方法具有靈敏度和精確度，可準確定量血漿中的痕量生物標志物。然而，Simoa®方法測定的血漿p-tau217的診斷價值和臨界值尚未在中國人群中得到驗證。因此，本研究的目的是：1）在年齡跨度較大的中國人群中建立血漿生物標志物（尤其是p-tau217）的參考區間（RIs）；2）確定血漿p-tau217和其他生物標志物（包括Aβ40、Aβ42和t-tau）在從MCI到癡呆的AD連續體中的診斷性能，以及它們在區分AD和其他常見類型癡呆中的價值；以及3）分析AD連續體患者血漿生物標志物和認知功能之間的相關性。

實驗方法

研究人群

所有患者均來自天津醫科大學總醫院記憶門診，由癡呆癥專家根據特定診斷標準進行診斷，包括60名AD癡呆患者、30名MCI患者、40名額顳葉變性(FTLD)患者和70名皮質下缺血性血管性癡呆(SIVD)患者；所有患者年齡為42–84歲。由另外兩個中心招募了150名認知無障礙(CU)健康個體，這些個體沒有主觀認知下降的癥狀，神經系統或神經心理學檢查結果正常。

生物標志物分析

血液使用EDTA管收集，并在抽取后2小時內離心（2500 rpm×15 分鐘，4°C）。然后將血漿分裝到聚丙烯管中，并在?80 °C下儲存直至分析。所有樣品在測試前再次離心（12,000 rpm×5分鐘，4°C），利用Quanterix的Simoa®酶聯免疫測定HD-X平臺對生物標志物濃度進行定量。使用ALZpath Simoa p-tau217 v2試劑盒（Quanterix,104371）檢測血漿p-tau217。使用Neurology 3-Plex Assay A Kit (Quanterix,101995)測量血漿Aβ42、Aβ40和t-tau水平。

統計分析

采用SPSS 26.0、GraphPad Prism 8.0版軟件和R統計軟件4.3.0版進行統計分析。采用受試者工作特征（ROC）曲線檢驗血漿生物標志物在AD患者與CU之間以及AD患者與其他類型癡呆患者之間的判別性能。計算AUC、截點以及相關的敏感度和特異度。

研究結果

1. 參考區間建立

共分析了240個樣本，樣本來自CU（n = 150）、MCI患者（n = 30）和AD患者（n = 60），以確定血漿生物標志物的RI。本研究中的RI為血漿p-tau217 0.006-0.47 pg/mL（圖1），t-tau為 1.320-5.678pg/mL，Aβ42為3.91-12.0 pg/mL，Aβ40為106-284 pg/mL，Aβ42/40比率為0.025-0.057。

圖1 血漿p-tau217參考區間

2.組間血漿生物標志物水平差異

各組血漿p-tau217水平存在顯著差異（圖 2）。AD組和MCI組的血漿p-tau217水平顯著高于CU對照組和其他兩組患者（所有p < 0.001），并且AD組高于MCI組（p < 0.001）。AD組和MCI組的Aβ42/Aβ40比值顯著低于CU對照組（vs.AD，p<0.001；vs.MCI，p<0.001）和FTLD組（vs.AD，p<0.001；vs.MCI，p<0.001），AD組顯著低于SIVD組（p=0.005），SIVD組顯著低于FTLD組（p=0.002）和CU組（p=0.002）。血漿t-tau水平，各組間無明顯差異（p=0.862）。

圖2 血漿生物標志物

3.血漿生物標志物的診斷和鑒別性能

生成了每種生物標志物與診斷狀態相關的ROC曲線（圖 3），結果顯示血漿p-tau217在區分AD患者與CU（AUC = 0.983，95% CI 0.941–0.998，p < 0.001）、FTLD患者（AUC = 0.936，95% CI 0.869–0.975，p < 0.001）和SIVD患者（AUC = 0.892，95% CI 0.825–0.939，p < 0.001）方面具有最佳的診斷分類性能。血漿Aβ42濃度和Aβ42/Aβ40比率在區分AD患者與CU（AUC = 0.715，95 % CI 0.625–0.793，p < 0.001；AUC = 0.760，95 % CI 0.674–0.833，p < 0.001）和FTLD患者（AUC = 0.842，95 % CI 0.756–0.907，p < 0.001；AUC = 0.780，95 % CI 0.686–0.857，p < 0.001）方面表現良好，但與SIVD患者（AUC = 0.578；AUC = 0.644）的表現不佳。血漿p-tau217在識別AD所致MCI患者方面的準確性也高于血漿Aβ42/Aβ40比率（AUC = 0.764, 95 % CI 0.662–0.847, p < 0.001）。然而，血漿t-tau和Aβ40 的診斷準確性較差，其AUC均小于0.70。

圖3 AD和MCI患者血漿生物標志物的診斷和鑒別準確性

4.血漿生物標志物在AD連續體中的認知相關性

各組間所有五個認知領域的MMSE評分和z評分均存在顯著差異。在AD和MCI患者中，血漿p-tau217水平與記憶（r = ?0.291，p = 0.007）、信息處理（r = ?0.234，p = 0.033）和視覺空間功能（r = ?0.259，p = 0.017）呈負相關（圖4B、C、F）。然而，在調整年齡、性別和教育程度后，只有與記憶領域的相關性仍然顯著（r = ?0.218，p = 0.047）。認知功能與血漿Aβ生物標志物或t-tau之間沒有顯著相關性。

圖4 阿爾茨海默癥患者血漿p-tau217濃度與認知功能的相關性

結果與討論

本研究在中國人群中建立了用Simoa®測量的血漿生物標志物，特別是p-tau217的參考區間。與CU相比，AD引起的MCI患者的血漿p-tau217顯著升高，而AD癡呆患者p-tau217進一步升高。血漿p-tau217對AD的診斷和鑒別準確率明顯高于其他血漿生物標志物。在AD連續體患者中，血漿p-tau217水平與認知功能（尤其是在記憶領域）存在相關性。結果表明，血漿p-tau217是一種反映AD淀粉樣蛋白和tau病理的生物標志物，可應用于廣泛的臨床實踐，包括AD患者的識別和區分。本研究確定了中國人群血漿p-tau217 的診斷和鑒別值，包括年齡范圍廣泛的CU個體、從MCI到癡呆的AD連續體患者，以及患有其他類型癡呆癥（如FTLD和SIVD）的患者。在本研究中，我們證明了用Simoa®測量的血漿p-tau217對中國隊列中的AD具有出色的診斷性能。血液中p-tau217的檢測有望成為臨床實踐中的寶貴補充，作為懷疑或排除AD病理的快速篩查測試以及指導和評估DMT的使用。