1、常規的細胞凍存主要采用DMSO+血清的方式，賽爾瑞成進行凍存液的無血清、低（無）DMSO、無蛋白這些方向持續開發的原因是什么？

        細胞凍存液的研發歷史可以追溯到20世紀中期，隨著細胞生物學和低溫生物學的發展，凍存液逐漸優化和改進。20世紀60年代，DMSO成為常用冷凍保護劑，廣泛應用于細胞凍存。隨后，凍存液中開始添加胎牛血清（FBS）等成分，提供營養和保護。20世紀80年代，科學家優化凍存液配方，調整DMSO和血清濃度，減少毒性并提高凍存效果。

        DMSO作為常用的冷凍保護劑，在較高濃度或長時間暴露下會對細胞產生毒性，影響細胞活力和功能。因此降低其濃度或尋找替代品是必要的。
血清因其成分復雜、存在批次差異、成分不明確、存在病原體污染風險等原因，應用無血清凍存液已成為細胞凍存領域主流。

        蛋白在凍存液中的添加可能為后續實驗和監管引入不可控的變量，且高質量蛋白成本高，往往會提高凍存液的成本。

        賽爾瑞成自2018年推出第一款經典的無血清細胞凍存液以來，CRD系列無血清細胞凍存液因其過硬且穩定的產品質量，獲得了國內數百家實驗室和企業用戶的認可，廣泛服務于國內細胞生物學研究和應用。

        2、應用CRD系列凍存液進行細胞凍存前需要注意什么？

        由于各類動物細胞株（系）通常都比較脆弱，對所處的環境要求較高，而細胞凍存是讓人工干預，強行讓細胞處于一種缺營養的“冬眠”狀態，所以凍存之前的細胞狀態對凍存的效果非常關鍵，建議凍存之前，務必讓細胞處于良好的對數期狀態，凍存之前細胞存活率應接近或達到100%。對于貼壁細胞，凍存之前，胰酶消化要適度，吹散和重懸動作要適當，以免損傷細胞狀態。過度消化或未輕柔吹打和重懸的細胞由于狀況較差，通常不宜再冷凍保存。觀察凍存前的細胞狀態應該在消化重懸完成后進行，以確認凍存時的細胞狀態良好。

        3、應用賽爾瑞成的CRD系列無血清細胞凍存液發現有的細胞凍存效果不好？有什么建議？

        CRD系列無血清細胞凍存液主要依據成分的差異進行產品命名，均為通用型細胞凍存液，經過廣泛測試驗證，適用于絕大多數哺乳動物（包括人）原代細胞、傳代細胞系以及雜交瘤細胞的凍存等。
        因為細胞來源各異、種類繁多，并且新的細胞株（系）不停的涌現，甚至許多細胞都是經過工程化改造的細胞系，我們無法對市場上所有細胞株（系）進行全面驗證。因此，對于某些較為珍貴的細胞，建議用戶先進行短期（如一周以內）凍存效果預實驗，或者同時使用傳統含血清的常規凍存液進行對比測試，確認無誤后再進行正式批量凍存。

        4、凍存液瓶底出現沉淀，是不是產品質量出現問題？

        凍存液中沉淀的出現一般存在如下三種情況：

      （1）溶液配置、過濾分裝過程中，異物的帶入。賽爾瑞成的無血清細胞凍存液的生產過程均嚴格按照GMP體系進行管理，尤其在產品質檢和出庫前會進行雙重質檢，在外觀上能夠杜絕此類現象的發生。這種情況，在我們的產品中罕見發生。

      （2）溶液染菌。賽爾瑞成無血清細胞凍存液生產過程中有一個非常重要的步驟是用0.22μm孔徑濾膜進行除菌過濾，且整個操作過程是在百級的環境中進行操作。此外，我們會對每批終產品出廠前進行無菌檢測，確保終產品沒有染菌。

        為避免客戶在使用凍存液時，產生細菌污染，建議如下：
        ①在超凈工作臺或生物安全柜中進行操作，同時使用無菌的移液器、吸頭和容器，操作前后用75%乙醇或消毒劑清潔雙手。
        ②根據實驗需要，可以將大包裝凍存液分裝成小份進行保存，減少反復開啟瓶蓋帶來的污染風險；

      （3）鹽溶液析出
        為保證達到更優的保護效果，CRD系列無血清細胞凍存液含有維持細胞狀態良好的復合鹽離子成分，因此，在低溫保存一段時間后，瓶底可能會出現少量飽和析出的固體鹽沉淀，經嚴格測試，對細胞凍存保護效果無任何不利影響，此時只需取用上清，正常使用即可，或者離心去除沉淀或者用過濾器（0.22μm孔徑濾膜）過濾去除少許沉淀。一般飽和析出不會發生第二次。

        若您在使用賽爾瑞成CRD系列無血清細胞凍存液過程中遇到任何問題，歡迎隨時與我們聯系。