技術背景

細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子，均與蛋白質結合成核蛋白 (nucleoprotein)。其中真核生物的DNA又有染色體DNA與細胞器DNA之分。前者位于細胞核內，約占95%，為雙鏈線性分子；后者存在于線粒體或葉綠體等細胞器內，約占5%，為雙鏈環狀分子。除此之外，在原核生物中還有雙鏈環狀的質粒DNA；在非細胞型的病毒顆粒內，DNA 的存在形式多種多樣，有雙鏈環狀，單鏈環狀，雙鏈線狀和單鏈線狀之分。RNA是以DNA的一條鏈為模板，通過堿基互補配對原則，轉錄而形成的一條單鏈，主要功能是實現遺傳信息在蛋白質上的表達，是遺傳信息向表型轉化過程中的橋梁。在此過程中，tRNA攜帶與三聯體密碼子對應的氨基酸殘基，與正在進行翻譯的mRNA結合，而后rRNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構成蛋白質分子。相對來講，RNA分子比DNA分子要小很多，其種類，大小結構和功能均更加多樣化。

提取純化產品冊

大多數的分子生物學實驗都是從核酸的分離純化開始，進而展開下游的實驗，如 RT-PCR、qPCR 及酶促反應等等。核酸的純度、產量、質量都會直接影響下游實驗。因此，有效地去除各種雜質殘留和污染，并保證核酸的完整性，是完成下游實驗最基本的條件，這也說明了核酸的分離純化在分子生物學中的重要地位。核酸分離與純化的方法很多，應根據具體生物材料的性質與起始量，以及分離核酸的性質與用途而采取不同的方案。

目前，常見的核酸抽提純化方法主要三類：

溶液型的抽提方法：（酚CHCL3抽提、鹽析等）

柱式抽提方法：（離子交換、硅膠柱等）

磁珠純化方法

選購指南

RNA Keeper Tissue Stabilizer

用于保護新鮮組織RNA完整性的保存劑(R501)    

產品概述    

RNA Keeper Tissue Stabilizer是一種無毒的溶液，可迅速滲入組織內部，滅活內源RNase，立即穩定并保護RNA的完整性。新鮮的組織樣本無需液氮速凍，只要浸入RNA Keeper Tissue Stabilizer中，即可在37°C保存1天，室溫保存1周，4°C保存4周或在-20°C/-80°C長期保存，且反復凍融不會顯著影響RNA的完整性。RNA Keeper Tissue Stabilizer中存放的樣本可直接使用 RNA isolater總RNA提取試劑(Vazyme #R401)、(Vazyme #R701)或離心柱法 (Vazyme #RC101)提取RNA。RNA Keeper Tissue Stabilizer可用于腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、肌肉等軟性組織的保存，不適用于表面有蠟質或硬殼類的生物體樣本保存。

性能展示

將小鼠肝臟組織(1)和脾臟組織(2)保存在RNA Keeper中，分別在37℃放置1天，室溫放置1周，4℃放置4周后，用RNA isolater (Vazyme #R401)提取總RNA。電泳結果表明，28S、18S、5S條帶均清晰可見，說明RNA具有很好的RNA Keeper Tissue Stasilizer可有效保證樣本中RNA不被降解且樣本可在RNA Keeper Tissue Stasilizer中穩定儲存。
                               

操作流程概要

適用范圍

動物組織 / 細胞

組分

操作流程
1.樣品處理

①動物組織：把動物組織切成0.5 cm左右見方的組織塊，加入5倍體積的RNA Keeper。

②培養細胞：按照標準實驗操作方法收集細胞，用PBS 清洗后加入5-10倍體積的RNAKeeper。

③酵母：收集大約10⁸個細胞(12,000 g，2 min)，棄上清。加入 0.5~1 ml的RNAKeeper。長期保存時應將酵母細胞置于RNA Keeper中，室溫或4℃放置1小時，

然后離心收集細胞(12,000 g，5 min)，棄上清，再置于-80℃保存。

△只適用于較柔軟的植物組織，如嫩葉、嫩莖等；如果植物組織表面有蠟，則RNA Keeper不能充分滲入，嚴重影響RNA保護效果

2.樣品保存

樣品存儲于RNA Keeper中，一般可在4℃穩定保存4周。若要在-20℃/-80℃長期保存，需要將樣品浸入RNA Keeper后，4℃放置過夜，使溶液充分滲入到組織中后，再轉移至-20℃/-80℃。

3.RNA提取

去除RNA Keeper：組織塊可以直接用滅菌鑷子從RNA Keeper中取出，擠掉多余的RNA Keeper，并用吸水紙輕輕吸掉表面液體，立即置于裂解液中勻漿。細胞應先離心(>10,000 g，5 min)，收集細胞沉淀（由于RNA Keeper 密度較大，此時需要使用大于普通介質的離心力）。并用PBS洗滌一次。RNA提?。菏褂酶鞣N常見的RNA抽提試劑盒提取 RNA。

RNA Keeper Tissue Stabilizer

用于保護新鮮組織RNA完整性的保存劑(R502）

RNA Keeper-ICE是一種新型試劑，能使冰凍組織解凍并轉變到易于勻漿方法處理的狀態，從而提取高質量的RNA。當浸沒在RNA Keeper-ICE中的組織從堅硬的冰凍狀態變柔軟的過程中，該溶液可滲入組織，使RNase失活。組織一旦經RNA Keeper-ICE溶液處理，就能在室溫下操作而不用擔心RNA降解。樣品可在常溫下稱重，切割，或者進行多種實驗而不影響RNA質量。

性能展示

小鼠肝臟冰凍組織經過RNA Keeper-ICE解凍后研磨，提取的RNA進行瓊脂糖凝膠電泳。電泳結果表明，28S，18S，5S均清晰可見，說明RNA具有良好的完整性。RNA Keeper-ICE可有效保證RNA完整度的同時對冰凍組織進行解凍。

操作流程概要

適用范圍

動物組織 / 細胞

組分

操作流程

1.試劑預處理

將RNA Keeper-ICE于-70℃或-80℃預冷。

2.冰凍樣品處理

①動物組織：按100mg組織比不小于1 ml RNA Keeper-ICE的比例，將冰凍組織浸沒于預冷的RNA Keeper-ICE中。

△組織塊的厚度應不超過0.5cm, 否則會影響RNA Keeper-ICE的滲透效率，導致RNA穩定效果變差。

②培養細胞、白細胞：按照標準實驗操作方法收集細胞，用PBS清洗后加入至少10倍體積RNA Keeper-ICE，蓋緊管蓋，上下顛倒數次。此時沉淀是否被全部懸浮對實驗無影響。

-20℃存放至少16h后，組織即可進行勻漿；若不立即勻漿，組織可繼續于-20℃穩定存放6個月。

-20℃存放過程中，組織可從RNA Keeper-ICE中取出進行室溫切割、稱重等操作，之后繼續浸潤于RNA Keeper-ICE中-20℃保存。

△組織在室溫暴露時間不可超過30 min。

3. RNA 提取

將組織取出，用滅菌鑷輕輕擠掉多余的 RNA Keeper-ICE溶液，并用吸水紙輕輕吸掉表面液體，置于裂解液中立刻勻漿。

△如果是細胞樣品，10,000g，4℃ 離心 1 min，棄上清，加入裂解液。

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司，旨在為生命科學的發展提供較好的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線，在各個領域內向用戶提供較高的水平和質量穩定的產品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等客戶提供各種產品、技術支持與服務。

可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業資訊和完備的產品和物流服務。 專業的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產品推薦給國內從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業性的產品供應商，公司出資存備了大量現貨，配合優秀的銷售隊伍以及專業的技術支持，隨時為客戶提供服務