細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)在多個(gè)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用，例如在生物技術(shù)中用于化合物的生產(chǎn)，以及作為基礎(chǔ)研究中的模型系統(tǒng)。特別是在醫(yī)學(xué)研究中，液體培養(yǎng)仍然是理解和治療疾病的重要手段。

了解懸浮培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)、為什么需要嚴(yán)格監(jiān)測(cè)、可用于測(cè)量的不同方法，以及康濟(jì)爾科技提供的可能解決方案。

概述

在許多應(yīng)用中，培養(yǎng)通常是在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的。這種方法既可以用于特定物種的富集，也可以用于獲得更多的細(xì)胞量。目前市場(chǎng)上有各種各樣的容器可用于懸浮培養(yǎng)，例如埃爾倫邁耶瓶、旋轉(zhuǎn)瓶、帶擋板的瓶子、滾瓶和多孔板。為了進(jìn)行小規(guī)模的篩選和工藝優(yōu)化，好氧微生物和細(xì)胞通常在搖瓶中培養(yǎng)，因?yàn)檫@是一種低成本且易于操作的方式，可以進(jìn)行大量并行實(shí)驗(yàn)。此外，搖動(dòng)可以防止沉降、生物膜形成和細(xì)胞聚集，并促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的均勻分布。然而，錐形搖瓶的主要缺點(diǎn)是瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)條件的動(dòng)態(tài)變化，例如營養(yǎng)物質(zhì)的可用性、氧氣的消耗和代謝產(chǎn)物的積累。過量代謝、pH 值的變化以及氧氣的限制在小規(guī)模搖瓶培養(yǎng)中常常被忽視，最終可能導(dǎo)致后續(xù)放大培養(yǎng)中的失敗。因此，持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)狀態(tài)至關(guān)重要。

圖 1 顯示了使用帶四重?fù)醢鍌鞲衅鞯膿u瓶（250 毫升）在 100 和 150 rpm 下培養(yǎng)谷氨酸棒狀桿菌 ATCC 13287 的應(yīng)用。此圖改編自 Wittmann 等人的研究：“Characterization and application of an optical sensor for quantification of dissolved O2 in shake-flasks”，發(fā)表在《Biotechnol Lett.》期刊

實(shí)時(shí)測(cè)量

康濟(jì)爾科技 提供了 SFR vario 和 SFR 搖瓶讀數(shù)儀，這些系統(tǒng)采用光學(xué)化學(xué)傳感器技術(shù)，能夠以非侵入的方式測(cè)量搖瓶中的 pH 值和氧氣濃度。SFR 系統(tǒng)還可以記錄溫度和攪拌速度（rpm），為實(shí)驗(yàn)分析提供更多有價(jià)值的參考數(shù)據(jù)。

圖 2 顯示了在 37°C 條件下使用合成培養(yǎng)基在埃爾倫邁耶瓶中培養(yǎng)大腸桿菌 K12 的時(shí)間變化過程。在整個(gè)培養(yǎng)過程中，使用 SFR vario 監(jiān)測(cè)了氧氣濃度和 pH 值。

為了解決氧氣限制問題，需要增大培養(yǎng)基的表面積，因?yàn)檠鯕獾慕粨Q僅發(fā)生在培養(yǎng)基的表面。氧氣的輸入依賴于對(duì)培養(yǎng)基表面的攪拌，使空氣形成小氣泡進(jìn)入培養(yǎng)基中。有效的措施包括提高攪拌速度、優(yōu)化培養(yǎng)基體積與瓶體積的比例，以及使用帶擋板的搖瓶。這些措施都有助于提高氧氣的輸入效率。

圖 3 顯示了在 LB 復(fù)合培養(yǎng)基中，對(duì)兩瓶平行培養(yǎng)的大腸桿菌 DH5alpha 進(jìn)行在線氧氣監(jiān)測(cè)的結(jié)果。通過持續(xù)監(jiān)控和及時(shí)調(diào)整轉(zhuǎn)速（rpm），可以有效避免氧氣限制。在線測(cè)量還可以實(shí)現(xiàn)及時(shí)響應(yīng)，并對(duì)氧氣供應(yīng)進(jìn)行控制。同時(shí)，實(shí)時(shí)驗(yàn)證所采取措施的效果是否達(dá)到預(yù)期。

多通道搖瓶監(jiān)測(cè)設(shè)置

針對(duì)搖瓶培養(yǎng)的需求，康濟(jì)爾科技提供兩種不同的測(cè)量系統(tǒng)（如下圖所示）：

1. SFR vario：可同時(shí)監(jiān)測(cè)和測(cè)量氧氣、pH 值、生物量，并可選地測(cè)量二氧化碳。

2. SFR 搖瓶讀數(shù)儀：可在多達(dá) 9 個(gè)搖瓶中測(cè)量 pH 值和氧氣濃度。

通過軟件最多可控制 4 臺(tái) SFR vario 系統(tǒng)，因此可以同時(shí)讀取 4 個(gè)搖瓶的數(shù)據(jù)。使用 SFR 搖瓶讀數(shù)儀時(shí)，最多可將 7 臺(tái)設(shè)備連接在一起，從而同時(shí)監(jiān)測(cè)多達(dá) 63 個(gè)搖瓶。這兩種系統(tǒng)都支持自動(dòng)氧氣消耗率（OUR）計(jì)算，并適用于埃爾倫邁耶瓶、培養(yǎng)管或 T 型瓶中的樣品監(jiān)測(cè)。

關(guān)于康濟(jì)爾

康濟(jì)爾（上海）科技有限公司是一家專注于高精度分析儀器和傳感器開發(fā)、生產(chǎn)及銷售的創(chuàng)新型企業(yè)，致力于為制藥、生命科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品飲料等領(lǐng)域提供高質(zhì)量的檢測(cè)與分析解決方案。公司產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于科研實(shí)驗(yàn)室、生產(chǎn)車間和質(zhì)量控制部門，幫助客戶實(shí)現(xiàn)高效、精準(zhǔn)的檢測(cè)與分析。

公司與如德國PreSens等技術(shù)提供商建立合作關(guān)系，通過引入成熟的光學(xué)傳感技術(shù)，結(jié)合自主研發(fā)能力，推出符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)儀器和解決方案，包括支持氧氣檢測(cè)、密封完整性驗(yàn)證（CCIT）和殘氧分析的系統(tǒng)。公司提供多樣化的檢測(cè)方案，包括頂空殘氧和溶解氧檢測(cè)（熒光法和激光法）、CCIT測(cè)試服務(wù)方案（真空衰減、高壓放電、壓力衰減和質(zhì)量提取）等，全面滿足不同行業(yè)客戶的檢測(cè)需求。所有產(chǎn)品均嚴(yán)格按照GMP、CFR21 PART 11等國際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)計(jì)和生產(chǎn)，確保滿足行業(yè)的嚴(yán)苛要求。

康濟(jì)爾科技在全國設(shè)有銷售和服務(wù)網(wǎng)絡(luò)，覆蓋華東、華北、西南和華中地區(qū)、為客戶提供及時(shí)的技術(shù)支持和本地化服務(wù)。公司擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，能夠?yàn)榭蛻籼峁漠a(chǎn)品選型、安裝調(diào)試到售后維護(hù)的全流程支持，確保客戶獲得優(yōu)質(zhì)的使用體驗(yàn)。

公司秉承“創(chuàng)新、質(zhì)量、服務(wù)”的理念，專注于不斷提升產(chǎn)品性能和客戶滿意度。通過持續(xù)的研發(fā)投入和嚴(yán)格的質(zhì)量控制，康濟(jì)爾致力于為生命科學(xué)、制藥、食品工業(yè)等領(lǐng)域提供切實(shí)可靠的技術(shù)支持與服務(wù)。公司倡導(dǎo)誠信經(jīng)營、團(tuán)隊(duì)協(xié)作和持續(xù)學(xué)習(xí)，并希望與客戶和合作伙伴攜手，共同推動(dòng)相關(guān)行業(yè)的技術(shù)進(jìn)步與產(chǎn)業(yè)發(fā)展。