酶標板的選購及拆裝酶標板有哪些注意事項

　　BUNSEN教您如何選購酶標板有哪些注意事項：

　　在酶聯免疫吸附試驗中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯乙烯表面對抗原、抗體或抗原抗體復合物的吸附也起著重要作用。

　　BUNSEN酶標板一般要比細胞培養板貴，細胞板主要做細胞培養，也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板，一般不用做細胞培養，它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測，需要更高的要求和特定的酶標工作液。

　　一：根據酶標板底部的不同，可以分為平底、U型底、V型底

　　平底的折射率低，適于在酶標儀檢測;U型底的酶標板折射率較高，方便加樣、吸樣、混勻等操作，可以不用放在酶標儀上，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應的免疫反應。V底的酶標板可以精確的吸取樣品。

　　二：根據酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同，分為高結合力、中結合力和氨基化

　　高結合力：表面經處理后，其蛋白結合能力大大增強，可達300~400ngIgG/cm2，主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。

　　中結合力：經表面疏水鍵被動與蛋白結合，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

　　氨基化：經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯劑共價結合的能力，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無法結合;此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯劑中任何功能基團發生作用。

　　三：根據顏色分為透明、黑色、白色

　　透明的是常用的，用于最一般的酶聯免疫實驗。相對于透明的的板子，還有用于發光檢測用的不透明的板子，一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板自身會有光吸收，所以它的信號相對于白色的板子要低很多，因此一般用于檢測較強的光，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測，常用于一般的化學發光。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。有些客戶會問，用一般的酶標板可不可以進行發光檢測，回答是不可以的，因為一般從化學發光反應中發射出的光是各向同性的，也就是說各個方向上同等發射出來的。如果用透明的板子，光不僅會從垂直方向發散，還從水平方向發散出來。很容易的就會通過各個孔之間的間隙和孔壁。這樣的話，光較強時相鄰孔之間的影響就會很大，因此不能用透明的酶標板來進行化學發光實驗。

　　拆裝酶標板的注意事項：

　　酶標板在酶聯免疫吸附試驗中, 參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。

　　抗原、抗體和其它生物分子通過多種機制吸附至載體表面，這包括通過疏水鍵、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結合，以及通過表面改性后的親水鍵結合。

　　BUNSEN酶標板的使用注意事項:

　　拍板動作

　　當需要拍干板內的液體時，建議垂直向下拍打，保證板內殘留液體甩干程度的一致性。

　　嚴禁斜角拍干，斜角拍打的過程中會導致上下板條受力不均，易出現板條脫落的情況，且也會導致液體甩干程度不一致而影響實驗結果分析。

　　拆裝動作

　　當需要將板條拆下時，可從板條正面兩端輕輕向上掰動，然后摳取下來，務必要戴好無塵手套，以免污染板條而影響板條的透光性。

　　不可從板條的一端強行掰取，容易造成板條斷裂。

　　在裝板條時，要注意方向，板條兩端分別設計成方形和半圓形，半圓形那端必須裝在有凸起臺階的卡槽內(箭頭所在處)，切勿裝反。

　　將板條裝入板框后，在兩側和中間部位都需要進行按壓，壓實后方可進行后續實驗。

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