常見(jiàn)生物樣本的存儲(chǔ)和運(yùn)輸條件匯總
生物樣本是醫(yī)學(xué)研究的重要資源,其質(zhì)量在很大程度上決定著臨床結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。目前生物樣本及其提取產(chǎn)物主要有深低溫和常溫兩大類保存方式,針對(duì)不同科研的需求,更多的樣本保存方式也相繼問(wèn)世,本文將對(duì)常用的樣本保存方式及運(yùn)輸條件進(jìn)行小結(jié),可以收藏保存?zhèn)溆谩?/span>
樣本儲(chǔ)存條件
1. -196℃、-150℃ 深低溫凍存
超低溫凍存是理想的樣本保存方法,目前液氮(-196℃)是靠譜的樣本保存方法,然而由于樣本浸沒(méi)在液氮中,游離的組織碎片可能帶來(lái)交叉污染的潛在風(fēng)險(xiǎn),因此催生了氣相液氮(-150℃)的保存方式,就是將樣本置于液氮以上、氣相液氮的包圍之中,可以很好地避免交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。另外,也可以通過(guò)電力冰箱制冷達(dá)到-150℃的低溫效果,從而能滿足樣本的長(zhǎng)期保存需求。因?yàn)?137℃是水玻璃化溫度,低于此溫度時(shí)細(xì)胞內(nèi)能導(dǎo)致內(nèi)容物降解的一切生化反應(yīng)均處于失活狀態(tài),從而能達(dá)到長(zhǎng)期保存的要求。
2. -80℃
-80度低溫保存是凍存核酸較為理想的樣本保存方法:在不具有液氮保存條件的生物樣本庫(kù),也可以考慮使用-80℃深低溫冰箱來(lái)保存組織樣本。有研究表明,在-80℃條件下,DNA產(chǎn)量、完整性以及RNA產(chǎn)量可以維持長(zhǎng)達(dá)7年不發(fā)生明顯改變,但是RNA完整性在凍存5年后開(kāi)始下降。因此建議保存組織時(shí)候進(jìn)行分裝,再加入RNA特異性穩(wěn)定劑后凍存于-80℃,更有利于組織內(nèi)RNA的保存。
關(guān)于蛋白質(zhì)的保存,目前也以深低溫凍存為主,可以很好地保護(hù)其穩(wěn)定性。短期儲(chǔ)存也可以保存在-20°C的低溫冰箱中。
3. 常溫保存:鑒于深低溫凍存的運(yùn)輸與操作的不便性,常溫保存的方法應(yīng)運(yùn)而生。常溫保存技術(shù)的原理可類比線蟲(chóng)的脫水休眠現(xiàn)象,利用某些特殊技術(shù)或容器將脫水干燥后的樣本置于密閉環(huán)境中,或者向生物樣本中添加保護(hù)劑,使相關(guān)酶失活,從而達(dá)到常溫環(huán)境下保護(hù)樣本的目的。
樣本的運(yùn)輸條件01 全血/血漿/血清/干血片
DNA: 24h內(nèi)可室溫運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,72h內(nèi)運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室置于2-8℃條件,72h及更長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)輸需要在-20℃條件下。
RNA:4h內(nèi)分離血漿,5天內(nèi)能夠運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室可保存在2-8℃,5天及更長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸時(shí)需在-20℃條件下。
干血片可在室溫下運(yùn)輸。
02 肺泡灌洗液
24h內(nèi)可室溫運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室,72h內(nèi)需在2-8℃冷藏運(yùn)輸,72h及更長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸需采用-70℃或?yàn)楦鼑?yán)格的條件。
03骨髓
骨髓標(biāo)本應(yīng)在2-8℃條件下運(yùn)輸,如果用于RNA分析,應(yīng)該添加RNA穩(wěn)定劑。
04 口頰細(xì)胞
室溫條件下,核酸可穩(wěn)定存在1周,可室溫運(yùn)輸,檢測(cè)RNA,需放置在RNA穩(wěn)定劑中。
05 淋巴細(xì)胞層
從血液里分離的淋巴細(xì)胞,需在2-8℃冷藏運(yùn)輸,無(wú)法及時(shí)提取時(shí)應(yīng)放置-70℃以下儲(chǔ)存。
06 腦脊液
DNA病毒檢測(cè): 需在2-8攝氏度條件下運(yùn)輸,應(yīng)該保存在-20℃或-70℃或者更低溫度條件下。
RNA分析:立即置于冰上降溫,并置于干冰上運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。
07 細(xì)針抽取物
DNA病毒檢測(cè): 需在2-8℃條件下運(yùn)輸,應(yīng)該保存在-20℃或-70℃或者更低溫度條件下。
RNA分析:立即置于冰上降溫或置于RNA穩(wěn)定劑中進(jìn)行運(yùn)輸。
08 組織
DNA分析:新鮮組織應(yīng)該立即置于-20℃,并保持在冰上運(yùn)輸保存。
RNA分析:新鮮組織采集后立即采用液氮速凍,進(jìn)行運(yùn)輸保存。
石蠟包埋組織可室溫運(yùn)輸保存。
09 痰液
30min內(nèi)可在室溫下運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室,否則應(yīng)在4-8℃條件下運(yùn)送
010 糞便
可借助糞便收集盒及糞便采集管進(jìn)行采集,黃豆粒大小樣本即可。4h內(nèi)進(jìn)行核酸提取或-80℃低溫保存。
011 宮頸和尿道拭子
在檢測(cè)試劑廠家推薦的運(yùn)送培養(yǎng)基中運(yùn)輸。
012 植物組織樣本
采集體態(tài)正常的新鮮樣本放入樣本袋中做好標(biāo)記;樣本若有泥土一般需要洗滌,之后對(duì)其進(jìn)行干燥并盡快進(jìn)行核酸提取;常溫或者-20℃進(jìn)行運(yùn)輸保存。
這里需要注意的是樣本儲(chǔ)存在穩(wěn)定的條件下,應(yīng)避免反復(fù)凍融。
蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的實(shí)驗(yàn)室冰箱、超低溫冰箱,低溫存儲(chǔ)箱、液氮罐、-80冰箱廣泛應(yīng)用于生物樣本保存、生物試劑保存等。
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