磁珠可以與藥物、蛋白質(zhì)、酶、抗體或核酸結(jié)合,最開始的磁珠被廣泛應(yīng)用于多種體內(nèi)實驗,比如藥物傳遞、磁共振成像(MRI)造影劑和熱療等。但是因為磁珠材料本身的生物相容性和細胞毒性等等因素,限制了磁珠在體內(nèi)實驗的應(yīng)用,反而體外實驗應(yīng)用得到更廣泛的發(fā)展,本文主要綜述磁珠在體外實驗的用途,尤其應(yīng)用在臨床市場上的各種體外診斷技術(shù),以及學術(shù)科研領(lǐng)域生物分子的純化應(yīng)用,比如細胞和外泌體分離、核酸提取、生物藥物的靶點鑒定及代謝性質(zhì)研究、蛋白純化與免疫層析等等。
早在上個世紀70年代初就有科學家嘗試使用生物微球來分離細胞,1969年科學家Wigzell和Andersson就開始利用細胞表面抗原和特異性抗體的結(jié)合性質(zhì)原理,使用生物微球分離細胞,所用生物微球沒有磁性,分離速度慢,效率很低,且成本高昂。1977年成功開發(fā)磁性固相酶免疫分析技術(shù),為將來使用磁珠來分離細胞以及更廣闊的分子生物學研究應(yīng)用打下基礎(chǔ)。
1976年-1986年間,眾多科學家發(fā)明并改進了Dynabeads,一種彌散結(jié)構(gòu)且具有超順磁性的聚苯乙烯材質(zhì)的生物磁珠。科學家不僅可以精準控制磁珠的粒徑大小,開發(fā)1-100um之間粒徑大小的磁珠,而且磁珠表面官能團種類也豐富很多,廣泛用于選擇性細胞和生物分子的免疫磁分離,包括蛋白純化、細菌分離和核酸提取等。
生物磁珠技術(shù)發(fā)展至今,不僅磁珠本身的制造工藝,而且磁珠分離細胞的技術(shù)均已經(jīng)非常成熟,目前大部分磁珠廠家均有能應(yīng)用于細胞分離的產(chǎn)品,技術(shù)成熟的廠家有德國Miltenyi,美國Dynabeads,德國MagSERIONbeads,法國Ademtech等,大部分廠家均可以提供已經(jīng)包被對應(yīng)細胞表面抗原的抗體磁珠試劑盒,使用過程簡單方便,而且主要是3.0um粒徑或者更大的磁珠,比如Miltenyi有多種型號的磁珠類產(chǎn)品。
在生物領(lǐng)域一般根據(jù)磁珠的用途進行區(qū)分,不同用途的磁珠不管是尺寸,表面修飾,保存方式甚至是合成方法都是不同的。磁珠在生物領(lǐng)域目前的應(yīng)用有:核酸提取,化學發(fā)光,細胞分選,蛋白純化,生物催化,熒光標記,磁共振成像,磁熱治療等。磁珠的大小從納米級到微米級均可制備。
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