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LTQ-Orbitrap組合質譜作為一個快速分析工具可以對直接注入的生物樣品的代謝組進行研究。這個理念的一個有利的證據是通過流動注射方式將酵母細胞提取物注入質譜儀中，整個實驗采樣時間只有3分鐘。一張典型的質譜圖有幾千個質荷比信號，其中400個是與分析相關的(即：在相同試驗條件下，他們的信號強度比背景噪聲高3倍以上且至少有60%獲取的輪廓圖與之相關)。該方法對基質效應、線性關系和批內分析精密度進樣了驗證。Orbitrap質譜的質量測量可以區分同重的離子，而且可以對感興趣的離子進行元素組成進行分析和鑒定且質量誤差在5ppm以下。通過線性離子阱的多級質譜和Orbitrap質譜對子離子的質量測定，可以推測可能結構。當我們將該方法用于鎘的毒性研究時，它與zui初開發用于目標分析的液相色譜-電噴霧-串聯質譜方法取得了相同的效果。用多元統計分析也得到了相同的代謝指紋圖譜。該結果表明在鎘存在的情況下氨基酸的代謝發生了改變，增加了谷胱甘肽的合成。
因為飛行時間質譜和四級桿-飛行時間質譜具有很高的掃描速率，所以他們也非常適合對樣品進行全面分析。在內標校正下能得到質量數小于5ppm的高分辨率。在質量分辨率8000-12000可以將同重離子分開。 (m/¢m， FWHM，即zui大半峰寬)。
雖然通過減少離子抑制和通過保留時間，準確質量數，二級質譜圖對化合物鑒定是有用的，但是色譜分離影響被分析代謝指紋圖譜的信息量，因為缺少任何一種固定相可以對代謝組中具有多樣性的化學組分實現*分離。結果，至少需要兩個色譜分析系統用于研究整個代謝組譜圖。 此外，在多變量和單變量的數據分析方法學(背景噪聲抑制和色譜峰調整比對) 之前的液相色譜質譜數據的處理仍然存在問題。一些分析相關的質荷比信號會被排除，在對背景噪音消除過程中和對保留時間漂移的的校正時可能產生人為的假象。在本文中，在沒有任何前期的色譜分離步驟將生物樣品直接注入質譜儀里對代謝組研究將是一個具有吸引力的選擇。
雖然直接注射質譜分析(DIMS)已經用低分辨質譜或飛行時間質譜進行了研究，但是超高質量分辨率儀器例如傅立葉變換離子回旋共振(FTICR)質譜儀是上述方法的又一選擇。通過在質譜圖上的質量數（亞ppm級的誤差）可以提供低分子量物質(即分子量在1000以下)的元素組成，這無疑可以區分同重離子。盡管具有相似質量數代謝物不能被區分的，但可以通過色譜分離實現辨別。也可以用各種活化模式進行多級質譜分析來實現分辨。如對于荷正電的單電荷和多電荷可用持續失諧衰減輻射碰撞誘導解離和紅外多光子裂解，對于帶多質子離子進行電子捕獲裂解和電子轉移解離裂解，對于帶多個負電的離子用EDD進行裂解。實現對子離子的質荷比進行準確測定。然而，由于傅立葉變換離子回旋共振質譜儀(FTICR)在高強磁場下和昂貴費用才能運轉，而且常需要長時間優化，故目前沒有普遍使用。如今，這個問題被zui近出現的超高分辨率LTQ Orbitrap組合質譜所解決。 該設備的前面部分是一個線性離子阱(二維離子阱)，它能記錄一級質譜和來自前提離子選擇的多級質譜圖。與傳統的三維離子肼相比，線性離子肼能提供更好的動態范圍，較低的低質量截止點，以及由于電子云分布在軸上而不是三維中心上故有較低的空間電荷效應，因此提高了靈敏度。離子在被注入到Orbitrap質量分析器中首先被C肼短暫累積。離子不是通過錘型磁場捕捉，而是儲存在由軸式中心電極和共軸外電極形成的靜電場。通過傅里葉變換過程得到不同質荷比離子的震蕩頻率，可以準確讀取質荷比。Orbitrap質量分析器得到的瞬時信號與中心電極軸運動有關，是由于傅里葉回旋共振儀器的輻射回旋運動引起的。本文的研究目的是在質譜檢測前沒有任何色譜系統分離的情況下，用LTQ Orbitrap組合質譜快速對代謝指紋圖譜構建進行評價。目前為止, 這個理念的一個有利的證據是對酵母細胞提取物進行了研究。通過流動注射進樣，基于直接進樣的方法，我們發展了該方法并進行了驗證。同時，報道了代謝物鑒定的方法。然后將該方法應用于受鎘毒害情況下酵母的代謝反應。在*種目標分析方式下，從代謝指紋圖譜中提取生物相關的離子，并與三重四級桿質譜儀的結果進行比對。在全局代謝組分析方式下，通過多變量統計分析得到相同的代謝指紋圖譜。
結論：
我們發展了能夠快速對代謝組指紋圖譜的一個新方法。它基于將生物樣品直接注入一臺新型雜交質譜儀：LTQ Orbitrap組合質譜。這個理念的一個有利的證據是通過流動注射方式將酵母細胞提取物注入質譜儀中。在Orbitrap質譜儀中的準確質量數可以分辨同重離子，可以給出目標離子和子離子的元素組成且誤差范圍小于5ppm。通過線性離子肼的多級質譜和Orbitrap質量分析器對子離子準確質量的測定可以進行結構推測，雖然缺乏色譜分離而且是在低分辨的線性離子肼內對母離子進行選擇，但是本研究表明有可能通過子離子的準確質量數測量分辨出同重離子，有可能通過裂解方式不同區分同分異構體。
該方法對基質效應、線性關系和批內分析精密度進樣了驗證。 雖然方法的靈敏度受基質效應的影響，卻是色譜方法的一種有競爭力的選擇，色譜方法有費時，耐用性不好，需要批間比對和數據處理等諸多缺點（即背景噪音抑制，不同色譜圖保留時間漂移的校正）
當研究鎘對酵母毒性時，雖然液相色譜-電噴霧-串聯質譜的精密度比DIMS更高，但是DIMS能得到與液相色譜-電噴霧-串聯質譜相似的結果。雖然DIMS不如液相色譜-電噴霧-串聯質譜靈敏，但是卻能檢測大多數代謝物。同一代謝指紋圖譜進行多變量統計分析，突出顯示了在鎘存在下氨基酸庫發生修飾，谷胱甘肽合成增加。
綜上所述，該結果說明LTQ Orbitrap組合質譜質量分析器能夠發揮多面手的能力，對同一代謝指紋圖譜既可以做目標分析又可做全面分析。zui后，由于LTQ的高靈敏度和Orbitrap質量分析器的準確質量測量和寬動態范圍，有可能在幾分鐘內獲得復雜和具有豐富信息的代謝指紋圖譜，通過手工提取目標分子的質荷比信號或者通過統計學工具可分別進行目標和全局分析。
因為飛行時間質譜和四級桿-飛行時間質譜具有很高的掃描速率，所以他們也非常適合對樣品進行全面分析。在內標校正下能得到質量數小于5ppm的高分辨率。在質量分辨率8000-12000可以將同重離子分開。 (m/¢m， FWHM，即zui大半峰寬)。
雖然通過減少離子抑制和通過保留時間，準確質量數，二級質譜圖對化合物鑒定是有用的，但是色譜分離影響被分析代謝指紋圖譜的信息量，因為缺少任何一種固定相可以對代謝組中具有多樣性的化學組分實現*分離。結果，至少需要兩個色譜分析系統用于研究整個代謝組譜圖。 此外，在多變量和單變量的數據分析方法學(背景噪聲抑制和色譜峰調整比對) 之前的液相色譜質譜數據的處理仍然存在問題。一些分析相關的質荷比信號會被排除，在對背景噪音消除過程中和對保留時間漂移的的校正時可能產生人為的假象。在本文中，在沒有任何前期的色譜分離步驟將生物樣品直接注入質譜儀里對代謝組研究將是一個具有吸引力的選擇。
雖然直接注射質譜分析(DIMS)已經用低分辨質譜或飛行時間質譜進行了研究，但是超高質量分辨率儀器例如傅立葉變換離子回旋共振(FTICR)質譜儀是上述方法的又一選擇。通過在質譜圖上的質量數（亞ppm級的誤差）可以提供低分子量物質(即分子量在1000以下)的元素組成，這無疑可以區分同重離子。盡管具有相似質量數代謝物不能被區分的，但可以通過色譜分離實現辨別。也可以用各種活化模式進行多級質譜分析來實現分辨。如對于荷正電的單電荷和多電荷可用持續失諧衰減輻射碰撞誘導解離和紅外多光子裂解，對于帶多質子離子進行電子捕獲裂解和電子轉移解離裂解，對于帶多個負電的離子用EDD進行裂解。實現對子離子的質荷比進行準確測定。然而，由于傅立葉變換離子回旋共振質譜儀(FTICR)在高強磁場下和昂貴費用才能運轉，而且常需要長時間優化，故目前沒有普遍使用。如今，這個問題被zui近出現的超高分辨率LTQ Orbitrap組合質譜所解決。 該設備的前面部分是一個線性離子阱(二維離子阱)，它能記錄一級質譜和來自前提離子選擇的多級質譜圖。與傳統的三維離子肼相比，線性離子肼能提供更好的動態范圍，較低的低質量截止點，以及由于電子云分布在軸上而不是三維中心上故有較低的空間電荷效應，因此提高了靈敏度。離子在被注入到Orbitrap質量分析器中首先被C肼短暫累積。離子不是通過錘型磁場捕捉，而是儲存在由軸式中心電極和共軸外電極形成的靜電場。通過傅里葉變換過程得到不同質荷比離子的震蕩頻率，可以準確讀取質荷比。Orbitrap質量分析器得到的瞬時信號與中心電極軸運動有關，是由于傅里葉回旋共振儀器的輻射回旋運動引起的。本文的研究目的是在質譜檢測前沒有任何色譜系統分離的情況下，用LTQ Orbitrap組合質譜快速對代謝指紋圖譜構建進行評價。目前為止, 這個理念的一個有利的證據是對酵母細胞提取物進行了研究。通過流動注射進樣，基于直接進樣的方法，我們發展了該方法并進行了驗證。同時，報道了代謝物鑒定的方法。然后將該方法應用于受鎘毒害情況下酵母的代謝反應。在*種目標分析方式下，從代謝指紋圖譜中提取生物相關的離子，并與三重四級桿質譜儀的結果進行比對。在全局代謝組分析方式下，通過多變量統計分析得到相同的代謝指紋圖譜。
結論：
我們發展了能夠快速對代謝組指紋圖譜的一個新方法。它基于將生物樣品直接注入一臺新型雜交質譜儀：LTQ Orbitrap組合質譜。這個理念的一個有利的證據是通過流動注射方式將酵母細胞提取物注入質譜儀中。在Orbitrap質譜儀中的準確質量數可以分辨同重離子，可以給出目標離子和子離子的元素組成且誤差范圍小于5ppm。通過線性離子肼的多級質譜和Orbitrap質量分析器對子離子準確質量的測定可以進行結構推測，雖然缺乏色譜分離而且是在低分辨的線性離子肼內對母離子進行選擇，但是本研究表明有可能通過子離子的準確質量數測量分辨出同重離子，有可能通過裂解方式不同區分同分異構體。
該方法對基質效應、線性關系和批內分析精密度進樣了驗證。 雖然方法的靈敏度受基質效應的影響，卻是色譜方法的一種有競爭力的選擇，色譜方法有費時，耐用性不好，需要批間比對和數據處理等諸多缺點（即背景噪音抑制，不同色譜圖保留時間漂移的校正）
當研究鎘對酵母毒性時，雖然液相色譜-電噴霧-串聯質譜的精密度比DIMS更高，但是DIMS能得到與液相色譜-電噴霧-串聯質譜相似的結果。雖然DIMS不如液相色譜-電噴霧-串聯質譜靈敏，但是卻能檢測大多數代謝物。同一代謝指紋圖譜進行多變量統計分析，突出顯示了在鎘存在下氨基酸庫發生修飾，谷胱甘肽合成增加。
綜上所述，該結果說明LTQ Orbitrap組合質譜質量分析器能夠發揮多面手的能力，對同一代謝指紋圖譜既可以做目標分析又可做全面分析。zui后，由于LTQ的高靈敏度和Orbitrap質量分析器的準確質量測量和寬動態范圍，有可能在幾分鐘內獲得復雜和具有豐富信息的代謝指紋圖譜，通過手工提取目標分子的質荷比信號或者通過統計學工具可分別進行目標和全局分析。
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