葉片的Pn受內部生理因素如生育期、葉齡、不同部位葉片的影響，還受到環境因素光、溫、水、CO2、風速等的影響。因此，要正確的比較處理間的光合差異，掌握測試方法是非常重要的。

　　1)選擇同樣生育期、相同葉齡、部位的葉片進行比較。如光合作用對產量的影響會隨作物生育期不同而不同，因此，據研究目的首先應確定測試的時期。對大量的基因型進行測定時，要在做好生育期調查記載的同時，按生育進程分組、分批測定，同時在測試時有目的地選擇一些有代表性的植株，使試材間生育期不同造成的影響在一定程度上降到低。

　　2)測試葉位的選擇。對于品種、處理間的比較，一般選擇對產量影響大、光合速率高的葉片，如小麥、水稻為旗葉，玉米為棒三葉(以穗上葉為，其葉片傾角受穗大小的影響較小)，棉花打頂前為倒5展葉，打頂后為倒一展葉。　　

　　3)測定時期的選擇。根據不同的研究目的選擇適宜的測定時期非常重要，這樣可避免盲目測定，盡量減少測定次數而達到*效果。因此，有必要先了解研究對象作物光合的大致特性。如小麥、玉米、水稻等作物單葉大光合一般出現在葉片展開至展開后的幾天，玉米群體光合zui大值出現在抽雄至吐絲期，棉花出現在盛花至盛鈴期。

　　4)測定時間的選擇。Ｃ3作物如小麥、棉花等大都有明顯的光合"午休"現象，其一日內光合大值一般出現在上午的9：30一11：30(當地時，下同)，午休出現在12:00一14:00。因此，對一批材料的測試可在9:30一11:30前后測完，或在9:30一11:30測完重復，在12:00一14:00測完第二重復，在15:00一16:30測完第三重復。玉米等Ｃ4作物不表現"午休"現象，Pnzui高值出現在中午，因此可在11:00一14:00時光強較穩定時測定。對大量材料采用輪回測定的方法，并熟練掌握操作技術，以縮短整個測試過程。并通過調節葉室向光方向，使一批樣能在相對統一的光強下完成測定，以避免不同材料由于入射PAR差異而產生誤差。

　　5)供試材料的準備。(1)在測定之前不要讓供試材料遭受急劇的環境變化。特別是冬季，溫室栽培植物不要直接搬到屋外低溫環境條件下。(2)帶入室內的供試材料盡可能放在明亮的地方，當長時間放在照度低的地方時，由于氣孔*關閉，測定開始后到出現光合速率大值要花費較多時間。(3)用離體葉測定時，要用刀片在水中剪斷，輸導組織內的水不要斷開。(4)選生長健康、代表性強的植株為試材。此外，由于源庫具一定的互作關系，應該在確定庫容量、授精或者輸導過程無異常的情況下進行測定。

6)測定呼吸速率時用兩層黑布罩在葉室上，待CO2穩定釋放后采樣。