遺傳學(Optogenetics),即結合遺傳工程與光來操作個別神經細胞的活性,發現腦部如何產生γ波(gamma oscillations),并為它們在調控腦部功能中的角色提供新證據,這將有助于發展一系列腦相關失調的新療法。
光遺傳學融合了光學及遺傳學的技術,控制特定細胞在空間與時間上的活動。其時間上程度可達到厘秒,而空間上則能達到單一細胞大小。2010年光遺傳學被Nature Methods選為年度方法,同年被Science認為是近十年來的突破之一 。
光遺傳學是由斯坦福大學的研究人員開始用于研究小鼠大腦的,他們將這項技術稱之為Optogenetics(optical stimulation plus genetic engineering 光刺激基因工程/光遺傳學),這個技術的關鍵是:科學家們必須事前向小白鼠體內注射一種植物基因,這種基因能夠對不同顏色光的刺激作出敏感的反應,還能通過自生特性感染類似的細胞。
使用這些光遺傳學(optogenetic)工具,能夠激活清醒哺乳動物的單一神經元,并直接演示神經元激活表現出的行為結果。這一光遺傳學方法使得研究人員能夠獲得關于脊髓回路的一些重要信息。這種新技術可以推廣到所有類型的神經細胞,比如大腦的嗅覺,視覺,觸覺,聽覺細胞等。光遺傳學開辟了一個新的讓人激動的研究領域,可以挑選出一種類型的細胞然后發現其功能。
當然現在說用于人體實驗還為時尚早,但是已經有一些研究成果已經開始逐漸走向臨床應用。 比如,斯坦福大學神經病Amit Etkin正在努力促進有關嚙齒類動物焦慮癥研究成果的轉化,以利用現有工具改善人類相關疾病的治療。他采用的是經顱磁刺激技術,希望能夠像激活小鼠大腦杏仁核區域的神經回路從而減輕它們的焦慮癥狀那樣來激活人腦中類似的回路。雖然這種技術不如光遺傳學技術有針對性,但卻具有非侵入性的優點。
無論如何,光遺傳學開辟了一個讓人激動的新研究領域,一些研究人員已經開始設想,如果能夠克服生物醫學的挑戰,確保新基因安全地遞送到人體內,基于光遺傳學的治療方法將直接應用于人類。
座落于美國加州的Mightex公司,于2012年推出了世界上*款令人激動的多波長五維可調光源,可以用于光遺傳學領域。
1. In Vivo Optogenetics:對于活體光遺傳學來說,光纖耦合的LED光源可以把光導入到特定的神經元上去,而不會對其他的神經元造成干擾。進而,多波長的光纖耦合LED光源可以使得在不改變空間位置的前提下,不同波長的光通過同一根光纖耦合導入到神經元上,讓科研實驗變得非常的方便。Mightex公司的FCS和WFC系列LED光源正是為此所專門設計。
2. In Vitro Optogenetics:對于體外光遺傳學來說,為了能夠刺激單個的神經元,因此需要顯微鏡來達到一定程度上的空間分辨率,對于光源來說,需要在顯微鏡的視場中對不同神經元的刺激進行的控制。Mightex公司的Polygon400 DSI多波長五維可調光源正是為此而設計。
Mightex公司的Polygon400光源內嵌有非常*的光學系統,能夠把來自于LED的光傳遞到DLP平臺然后又通過顯微鏡到達樣品表面,這種系統化的設計可以使得在保持有限衍射圖像性能的前提下達到zui大的光強度。
同時,由于Optogenetics對于時間性能會有一定的要求,因此即便在超過4000fps的刷新率以及快速切換的LED情況下,Ploygon400仍然能夠以微秒的精度來對光源進行控制;同時,用戶可以從400-700nm的范圍內zui多3個LED波長內置于光源引擎中。
而以上的種種控制,都可以通過Ploygon400自帶的軟件很容易的完成并由用戶進行為便捷的控制,包含了時間特性,強度特性,波長特性,X以及Y軸的移動特性。
Polygon400性能規格
可用的LED波長和輸出功率
|
控制和時間
參數 | zui小 | zui大 | 單位 |
數位 | 1 | 8 | Bit |
曝光時間@1bit | 250 | - | μs |
幀頻@1bit | 4, 000 | - | 1/sec |
曝光時間@4bit | 1, 600 | - | μs |
幀頻@4bit | 625 | - | 1/sec |
曝光時間@8bit | 8,333 | - | μs |
幀頻@8bit | 120 | - | 1/sec |
輸入觸發器 | TTL / BNC | ||
輸入觸發延遲 | TBD | TBD | μs |
輸出觸發器 | TTL / BNC | ||
輸出觸發延遲 | TBD | TBD | μs |
如何選擇型號?
DSI- | x- | xxxx- | xxxx- | xxxx- | xxx |
I-內置LED F-光纖或光導輸入 | 波長1 | 波長2 | 波長3 | 內部 使用 |
參考型號價格
目前,這款Polygon400光源已經為數不少的研究人員購買并正在使用。
除了上述提到的Polygon400光源,針對于光遺傳學應用,Mightex公司還有價格比較低廉的單波長與多波長光纖耦合LED供選擇。
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