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Hoechst 33342 /PI細(xì)胞凋亡染試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：R21807

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  尚寶生物生產(chǎn)的細(xì)胞凋亡熒光 Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡(jiǎn)便的細(xì) 胞凋亡與細(xì)胞壞死檢測(cè)方法。本試劑盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方 法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，染色質(zhì)會(huì)固縮。Hoechst33342 可以穿透細(xì)胞膜，染色后凋亡細(xì)胞熒光會(huì)比正常細(xì)胞 明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜，對(duì)于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對(duì)于 壞死細(xì)胞，其細(xì)胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細(xì) 胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)時(shí)，正常細(xì)胞為弱紅色熒光＋弱藍(lán)色熒光，凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光， 壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光＋強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖，左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞，右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì) 胞。

染色快速方便，兩種染料的染色僅需 20-30 分鐘，一步染色即可完成。使用方便，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè) 時(shí)，無(wú)需稀釋等配制過(guò)程，也無(wú)需再準(zhǔn)備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測(cè) 100 個(gè)樣品，每個(gè)樣品的細(xì)胞 數(shù)量可以為 1×10 5-1×10 6。

產(chǎn)品內(nèi)容：

操作步驟：

1. 每個(gè)樣品收集約 10-100 萬(wàn)細(xì)胞于 1.5ml 離心管內(nèi)，離心棄上清。細(xì)胞沉淀用 0.8-1ml 細(xì)胞染色緩沖液 重懸。

2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。

3. 加入 5 微升 PI 染色液。

4. 混勻，冰浴或 4℃孵育 20-30 分鐘。

5. 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)紅色熒光和藍(lán)色熒光。

6. 如果使用熒光顯微鏡檢測(cè)，檢測(cè)前離心沉淀細(xì)胞，用 PBS 洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍(lán)色熒光。 對(duì)于貼壁細(xì)胞使用熒光顯微鏡檢測(cè)，可以不收集細(xì)胞，直接依次按照上述比例加入細(xì)胞染色緩沖液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分鐘。染色后 PBS 洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀察。

注意事項(xiàng)：

1. 需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行紅色和藍(lán)色雙熒光檢測(cè)。也可使用熒光顯微鏡檢測(cè)。

2. 染色后宜盡快檢測(cè)。

3. Hoechst 33342 對(duì)人體有害，碘化丙啶(PI)對(duì)人體有刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件：

4℃保存六個(gè)月有效，-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存