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淋巴細胞培養基（放射工作人員體檢）

產品名稱：

通用名稱：淋巴細胞培養基

英文名稱：Lymphocyte Medium

包裝規格：4ml/瓶，56 瓶/盒

預期用途：

  本產品為細胞標本前處理試劑，用于淋巴細胞增殖培養，培養后的淋巴細胞用于體外診斷，該產品不用于 治療性用途。

主要組成成分：

  RPMI1640、小牛血清、肝素、PHA 等。

使用方法：

1. 采血與接種

  采取外周血 1-2ml，在無菌條件下立即種血 0.3ml（7 號針頭約 20 滴）至淋巴細胞培養基內，充分搖勻。

2. 培養

  將培養瓶放入 37℃恒溫箱中培養 48-52 小時，培養期間注意觀察培養基有無凝血、溶血或長菌的現象 （可培養 24 小時后將培養基輕搖一次，以便細胞可以獲得充分的營養）。

3. 制片

3.1 秋水仙素處理：

  在終止培養前 24h，加入濃度為 10μg/ml 的秋水仙素 1-3 滴（7#針頭豎滴）后，繼續培養 24 小時；

3.2 收細胞：

  將培養完成的培養基倒入對應的離心管內，以 1500rpm 離心 7-10 分鐘，棄去上清液；

3.3 低滲：

  向離心管內加入 37℃預溫的低滲液（0.075mol/L 氯化/鉀溶液）8ml，用吸管反復吹勻 10 次，置 37℃水浴箱中水 浴 25-35 分鐘；

3.4 預固定：

  向低滲的細胞懸液內緩慢加入新配制的固定液（甲醇和乙酸按 3:1 的比例混合）1-1.5ml，輕輕混勻后 1500rpm 離 心 7-10 分鐘，棄去上清液；

3.5 固定：

沿管壁緩慢加入現配的新配固定液約 8ml 輕輕混勻，置室溫放置 20 分鐘，然后 1500rpm 離心 8 分鐘，棄上清。 加入固定液再重復固定一次。用固定液將沉淀調成細胞懸液（不宜太濃，一般加固定液至 0.3ml）在冰片或 37℃ 預溫的玻片上滴片，每張片上滴 2 滴。

4. 染色

  滴片自然干燥后用 10%的吉姆薩染液中染色 10 分鐘，自來水沖洗干凈，用吹風機吹干或自然干燥后，即可閱片。

注意事項：

1. 采集的外周血若立即接種則無需加肝素抗凝，如需保存標本，應加肝素抗凝；

2. 采集的外周血在冰箱 4℃保存，保存期不亦超過 72h。

儲存條件及有效期：

  4-8℃保存，有效期 1 個月，-5℃以下保存，有效期 12 個月，可穩定至保質期末。