D-PBS緩沖液（不含鈣鎂和酚紅）

產品貨號：T16705

產品規格：500ml

產品簡介：

D-PBS，液體，不含鈣、鎂和酚紅。過濾除菌。PH值范圍 7.2-7.4。

產品組成：

操作說明：

1. 懸浮細胞，2000rpm離心5min收集細胞對于貼壁細胞要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短(過長細胞膜破碎，造成假陽性，過短，細胞黏連影響檢測)最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，吸除胰酶消化液，加入細胞培養液終止消化，2000rpm離心5min收集細胞。

2. 4℃預冷PBS洗滌細胞2次(2000rpmx5min)收集細胞2~5×10⁵。

3. 離心棄上清，加入500uL結合緩沖液，輕輕吹打重懸細胞。

4. 加入5uLAnnexin V-FITC輕輕吹打混勻，加入5uLPI輕輕吹打混勻室溫避光孵育5-15min。(PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高時間允許，可以在檢測前5分鐘加入PI。

5. 流式細胞儀檢測或熒光昂微鏡觀察。最好在1h內檢測。

注意事項：

1. 盡管經測試AnnexinV-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融。

2. 如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。

3. 染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋廣或壞死細胞的數量增加。

4. 如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解AnnexinV-FITC，導致染色失敗。

5. 熒光物質均易發生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。

6. 用于流式細胞儀檢測時，如果發現AnnexinV-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數也無法改善，可以用PBS將AnnexinV-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞.

7. 需自備PBS。

8. 本產品僅限干專業人員的科學研究用，不得用干臨床診斷或治療，不得用干食品或藥品，不得存放干普通住宅內。

9. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12個月有效。