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兔胰腺導管上皮細胞

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更新時間:2024-11-05 16:12:51瀏覽次數:820

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8471 主要用途 僅供科研研究實驗
兔胰腺導管上皮細胞公司正在出售的產品:GL-261小鼠膠質細胞瘤 WRL68 (人肝細胞) (Hela污染細胞系) 兔牙周膜成纖維細胞 組蛋白轉錄調節蛋白1抗體 小鼠脊髓星形膠質細胞 SV40 MES 13 (小鼠腎小球系膜細胞) 人子宮成纖維細胞 磷酸化磷酸神經膜抗體

詳細介紹

兔胰腺導管上皮細胞

兔胰腺導管上皮細胞

商品屬性:

組織來源

產品規格

細胞形態

貨號

胰腺

5×105cells/T25細胞培養瓶

上皮細胞樣

YS-01X8471

細胞簡介:

兔胰腺導管上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。成體胰腺導管上皮細胞作為胰腺前體細胞,已證實具多向分化潛能,在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細胞,胰腺導管上皮細胞轉分化的胰島樣細胞免疫原性如何,轉分化的胰島樣細胞在治療糖尿病時是否發生免疫排斥反應,對干細胞臨床治療糖尿病具有重要意義。

原代細胞的培養條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養

  1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的兔胰腺導管上皮采用-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法、差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

實驗室分離的兔胰腺導管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:上皮細胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

兔胰腺導管上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

兔胰腺導管上皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養法

  組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養法

  ③ 懸浮細胞培養法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

  ④器官培養

  器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

兔胰腺導管上皮細胞


公司正在出售的產品:

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核糖核酸酶3/Drosha抗體

糖基轉移酶28家族1抗體

FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原)

VSTM1重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

PDCD1LG2 Protein Rat 重組僀?僀

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原)

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

PDCD1LG2 Protein Rat 重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

VSTM1重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠P53(P53-ab)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒

HumanEsiol,E3ELISAKit 人雌三醇(E3)pcr檢測試劑盒分裝

Humancoagulationfactor,FⅨ試劑盒人Ⅸ(F)試劑盒規格:96T/48T

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Mouse ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒

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