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大鼠小腸Cajal間質細胞

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更新時間:2023-04-21 16:38:59瀏覽次數:226

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腸組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠小腸Cajal間質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

小腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質細胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質細胞,是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞,與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系,具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術,清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構;應用免疫熒光等生化技術,發現了其特殊表達的c-kit蛋白;利用電生理技術,得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來,學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  不建議傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

組蛋白去乙酰化8抗體 Malectin蛋白封閉多肽 

G蛋白偶聯受體GPR157蛋白抗體 CD7封閉多肽 

酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體 TBC結構域家族D9B蛋白封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨蛋白激SIK1抗體 磷化血小板源性生長因子受體α封閉多肽 

表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體 凋亡相關蛋白TGFb信號封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框95抗體 RAB6蛋白封閉多肽 

肝細胞生長因子受體單克隆抗體 重組人白介6蛋白 

補體C9b抗體 泛蛋白連接2E2封閉多肽 

G蛋白結合蛋白2抗體 TPIT蛋白封閉多肽 

轉錄因子MEL1抗體 血小板p47蛋白封閉多肽 

程序性死亡配體2(CD273)抗體 腎小球裂孔膜蛋白PDCN 

富含脯氨突觸相關蛋白SHANK1抗體 細胞纖毛內轉運同源蛋白81封閉多肽 

原癌基因Yes相關蛋白1抗體 BEN結構域蛋白5封閉多肽 

HAUS3蛋白抗體 軸突導向因子SEMA6C封閉多肽 

宿主細胞因子2抗體 增殖相關蛋白MAGOH封閉多肽 

AF750標記小鼠抗人CD19單克隆抗體 嗅覺受體5AP2封閉多肽 

雪藻脂肪延長抗體 去整合樣金屬2封閉多肽 

磷化水通道蛋白2抗體 TBR1蛋白封閉多肽 
大鼠小腸Cajal間質細胞786-O [786-0]細胞專用培養基125mL×4786-O [786-0]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持786-O [786-0]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含786-O [786-0]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于786-O [786-0]細胞的體外培養。

AML12細胞專用培養基125mL×4AML12細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持AML-12細胞佳的生長狀態。本產品中已包含AML-12細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于AML-12細胞的體外培養。

大鼠外周血中性粒細胞培養基100mL大鼠外周血中性粒細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠外周血中性粒細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠外周血中性粒細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠外周血中性粒細胞的體外培養。

HAL-01細胞專用培養基125mL×4HAL-01細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持HAL-01細胞佳的生長狀態。本產品中已包含HAL-01細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HAL-01細胞的體外培養。

小鼠支氣管成纖維細胞培養基100mL小鼠支氣管成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠支氣管成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠支氣管成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠支氣管成纖維細胞的體外培養。

BGC-823細胞專用培養基125mL×4BGC-823細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持BGC-823細胞佳的生長狀態。本產品中已包含BGC-823細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BGC-823細胞的體外培養。

大鼠終板軟骨細胞培養基100mL大鼠終板軟骨細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠終板軟骨細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠終板軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠終板軟骨細胞的體外培養。


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