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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品名稱：食管平滑肌細胞

產品規格：5×105

貨號：BJ-01X1792

產品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

 

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，*進口來源，*保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

花生四烯-15-脂加氧B(ALOX15B)聯免疫吸附測定試劑盒 酚酞芥酯 分析標準品磷氫二鈉,無水 CP，98%

V-Rel網狀內皮增生病癌因同源物B (RELB)聯免疫吸附測定試劑盒酚酞絡合指示劑8-氧補骨脂素 分析標準品，≥98%磷氫二鈉,無水 PT

白介素24 (IL-24)聯免疫吸附測定試劑盒酚酞絡合指示劑中 分析標準品，≥98%磷氫二鈉,無水 SP

黑素瘤缺乏因子2(AIM2)聯免疫吸附測定試劑盒麝香草酚神經  分析標準品,≥99.0% (GC)磷氫二鈉,無水 99.99% metals basis

CD63/四旋蛋白30 (TSPAN30/CD63)聯免疫吸附測定試劑盒羅丹明123反式-9-十八烯酯  分析標準品磷氫二鈉，十二水 AR，99%

BTG3關聯核蛋白(BANP)聯免疫吸附測定試劑盒羅丹明123千層紙素A  分析標準品，≥98%磷氫二鈉，十二水 CP，98%

cGMP依賴性蛋白激I (PRKG1)聯免疫吸附測定試劑盒羅丹明B巖芹 分析標準品,>99%(GC)磷氫二鈉，十二水 GR，99%

磷二酯4D(PDE4D)聯免疫吸附測定試劑盒羅丹明B百秋李  分析標準品，>98%磷氫二鈉，十二水 ACS,98.0-102.0%

腦型肌激(CKB)聯免疫吸附測定試劑盒 羅丹明B蓖麻油 分析標準品，99%無水磷三鈉 AR

抗肝微粒體抗體(Anti-LKM-1 IgG)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯蓖麻油 >97.0%(T),>70%(GC)磷氫二鈉,無水 或昆蟲培養, ≥99%

賴氨酰氧化樣蛋白4(LOXL4)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯丹酚A  分析標準品，≥98%磷氫二鈉,無水 電泳級, ≥99%

腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯紫草素  分析標準品，≥97%磷氫二鈉,無水 分子生物學級，≥99.5% (T)

抗環胍氨肽抗體(ACCPA)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯雷公藤素  分析標準品，≥98%磷二氫鋅 SU

殺菌肽LL-37(LL-37)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯鹽鹽水合物雷公藤素  98%磷鋅 AR

胸腺肽α1(Tα1)聯免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯苯鹽鹽水合物毛蕊花糖苷 分析標準品磷鋅 CP,99.0%

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