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小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 11:49:18瀏覽次數(shù):267

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎動脈組織
小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:U251 MG/TMZ人類星形膠質(zhì)瘤唑胺細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106U266人骨髓瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106U87MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤人細(xì)胞系1×106U87MG+RFP人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤+RFP人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎動脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腎動脈組織;腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動脈在腎實質(zhì)內(nèi)形成兩個毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈平滑肌細(xì)胞是腎動脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅指蛋白799抗體 辛酰基化腦腸肽封閉多肽 人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(anti-RVIgM)ELISA試劑盒

高分子量激肽原輕鏈抗體 腫瘤抑制基因NME2封閉多肽 人催產(chǎn)(OT)試劑盒ELISA

/磷二酯家族成員6抗體 磷化腺苷單磷活化蛋白激β1封閉多肽 人妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒

骨髓基質(zhì)干細(xì)胞抗原1抗體 TRABD2A封閉多肽 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)elisa試劑盒

肌球蛋白輕鏈3抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1封閉多肽 人抗精子抗體(AsAb)試劑盒elisa

富亮氨重復(fù)激2抗體 FAM154A蛋白封閉多肽 人妊娠皰疹抗體(HG)檢測試劑盒elisa

英文名稱: Phospho-JNK1/2/3(T183+T183+T221) 腫瘤易感性候選基因5封閉多肽 人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒

細(xì)胞角蛋白2e抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白Q4封閉多肽 小鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)試劑盒ELISA

磷化CREB-1抗體 細(xì)胞色P450 2C8封閉多肽 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA檢測試劑盒

環(huán)指蛋白39抗體 磷化Src原癌基因封閉多肽 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒

/氫交換樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 UL16結(jié)合蛋白2封閉多肽 小鼠γ干擾(IFN-γ)試劑盒elisa

磷化細(xì)胞核因子抗體 撲草凈OVA偶聯(lián)物 小鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒elisa

英文名稱: TSHB 線粒體核糖體蛋白S35封閉多肽 小鼠白介13(IL-13)ELISA試劑盒

英文名稱: NF-L 轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1封閉多肽 小鼠白介18(IL-18)試劑盒ELISA

人類白細(xì)胞抗原E抗體 重組2 Spike突變蛋白S1(69/70 deletion,144Y deletion,N501Y, A570D, D614G, P618H) 人(TM)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Phospho-TrkB (Tyr817) 透明質(zhì)結(jié)合蛋白2 27kDa輕鏈封閉多肽封閉多肽 人Ⅶ(FⅦ)elisa試劑盒

殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1封閉多肽 人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)試劑盒elisa

磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1封閉多肽 人原(PT)檢測試劑盒elisa
小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞V79倉鼠肺細(xì)胞英文名稱:V791×1061640+20%FBS+1%P/S (鼠源種屬鑒定)

3D4/21豬肺泡巨噬細(xì)胞英文名稱:3D4/211×1061640(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1% PS (非人源非鼠源種屬鑒定)

PK-13豬腎細(xì)胞系英文名稱:PK-131×106DMEM+10%FBS+1%P/S  (非人源非鼠源種屬鑒定)

PK-15豬腎細(xì)胞英文名稱:PK-151×106MEM+10%FBS+1%P/S  (非人源非鼠源種屬鑒定)

PT-K75豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞英文名稱:PT-K751×106DMEM+10%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

PIEC豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:PIEC1×1061640+10%FBS+1%P/S(非人源非鼠源種屬鑒定)

B95-8EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞英文名稱:B95-81×1061640+10%FBS+1%P/S  (非人源非鼠源種屬鑒定)

 


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