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大鼠肺動脈成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 11:51:32瀏覽次數:278

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺動脈組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠肺動脈成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肺動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺動脈的正常形態;合成和釋放細胞外基質;組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

血栓調節蛋白抗體 p19ARF抑癌基因封閉多肽 人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒

激活復合物亞基1抗體 ADP核糖基化因子6封閉多肽 人載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒ELISA

p21激活激1抗體 磷化微管相關蛋白封閉多肽 人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒

eIF4A3蛋白抗體 增殖相關核仁抗原封閉多肽 人白血病抑制因子受體(LIFR)elisa試劑盒

Toll樣受體2(CD282)抗體 鋅指蛋白186封閉多肽 A(IgA)試劑盒elisa

kelch樣蛋白7抗體 p21活化蛋白激ARHG7封閉多肽 G(IgG)檢測試劑盒elisa

雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 神經細胞粘附蛋白NGN封閉多肽 M(IgM)ELISA試劑盒

胚胎干細胞相關蛋白TXNDC9抗體 LMO7蛋白封閉多肽 人纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒ELISA

磷化糖原合激3β抗體 脫氫E1β亞基封閉多肽 人纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA檢測試劑盒

磷化絲切蛋白抗體 紅細胞膜帶4.9蛋白封閉多肽 人血纖蛋白原降解產物(FDP)elisa試劑盒

磷化組蛋白乙酰轉移KAT5抗體 磷化6酰四氫蝶呤合成PTPS封閉多肽 人血栓調節蛋白(TM)試劑盒elisa

細胞角蛋白1抗體 DMRTA2蛋白封閉多肽 人血小板衍生生長因子(PDGF)檢測試劑盒elisa

波形蛋白抗體 6號染色體開放閱讀框72封閉多肽 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

Iroquois同源蛋白4抗體 間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白封閉多肽 人組織型纖溶原激活劑(t-PA)試劑盒ELISA

磷化蛋白激樣內質網激抗體 絲氨/蘇氨蛋白激18封閉多肽+O12390 人組織因子(TF)ELISA檢測試劑盒

HSH2D抗體 成骨細胞特異性因子2封閉多肽 人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)elisa試劑盒

核黃轉運蛋白2抗體 新型分泌細胞表面蛋白/成骨細胞相關蛋白SCUBE3封閉多肽 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒elisa

英文名稱: ACLY 紡錘體和著絲粒相關蛋白1封閉多肽 人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)檢測試劑盒elisa
大鼠肺動脈成纖維細胞人胰腺神經內分泌腫瘤細胞永生化英文名稱:人胰腺神經內分泌腫瘤細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

小鼠附睪脂肪干細胞永生化英文名稱:小鼠附睪脂肪干細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

小鼠骨髓巨噬細胞永生化英文名稱:小鼠骨髓巨噬細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

雞胚成纖維細胞永生化英文名稱:雞胚成纖維細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

豬主動脈內皮細胞永生化英文名稱:豬主動脈內皮細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

豬小腸上皮細胞永生化英文名稱:豬小腸上皮細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化英文名稱:雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報告

 


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