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大鼠神經少突膠質前體細胞

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更新時間:2023-04-21 13:01:21瀏覽次數:235

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠神經少突膠質前體細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。少突膠質細胞(oligodendrocyte)是中樞神經系統(CNS)的成髓鞘神經膠質細胞,其發育要經歷少突膠質細胞祖細胞、前少突膠質細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質細胞等階段。有學者將少突膠質細胞按其發育程度和形態分為三型。但是,細胞發育是一個連續的過程,其形態、表達產物和功能的演變沒有嚴格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質細胞又稱前O2A(pre-O2A progenitor cell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養時成簇生長在星形膠質表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達神GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養時為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質,故又稱為少突膠質細胞-Ⅱ型星形膠質祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達神苷脂GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質細胞。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標記物,同時也表達O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質細胞突起有如蜘蛛網,大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養的少突膠質細胞前體細胞(簡稱少突膠質細胞前體細胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質細胞,前兩者具有增殖能力。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶

6.質量檢測:

實驗室分離的經少突膠質前體細胞經A2B5免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  雙極、多極形

傳代特性  不傳代,不增殖,存活1-2周

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化雙微體2癌基因抗體 磷化周期E1封閉多肽 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

調節元件相關蛋白1抗體 肽酰tRNA水解ICT1封閉多肽 大鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒ELISA

骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切抗體 細胞色氧化缺失蛋白1封閉多肽 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒

嗅介蛋白樣蛋白2B抗體 卷曲螺旋結構域蛋白102B封閉多肽 大鼠免疫球蛋白G(IgG)elisa試劑盒

粘蛋白-1抗體 鋅指蛋白785封閉多肽 大鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒elisa

轉移生長因子β受體3抗體 突觸生長相關蛋白封閉多肽 大鼠內皮抑(ES)檢測試劑盒elisa

氫鉀ATP通道蛋白抗體 C型凝集結構域家族2成員H封閉多肽 大鼠腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒

磷化GATA結合蛋白3抗體 配子生成結合蛋白1封閉多肽 大鼠前列腺E2(PGE2)試劑盒ELISA

磷化CD244抗體 叉頭蛋白D2封閉多肽 大鼠神經特異性烯醇化(NSE)ELISA檢測試劑盒

人程序性死亡1單克隆抗體 轉錄因子Tbx3封閉多肽 大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa試劑盒

CD30抗體 重組猴痘病毒A29L蛋白 大鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒elisa

磷化死亡相關蛋白激3抗體 FAM103A1蛋白封閉多肽 大鼠纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒elisa

磷化蛋白激B抗體 FAM100B蛋白封閉多肽 大鼠纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體 趨化因子受體1封閉多肽 大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒ELISA

磷化絲裂原活化蛋白激3K9抗體 重組大鼠CD90蛋白 大鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA檢測試劑盒

去整合樣金屬15抗體 重組人IL-4 (活性的, Tag free) 大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)elisa試劑盒

SIAH結合蛋白1抗體 磷化p21激活激2封閉多肽 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒elisa

孕激受體抗體 鋅指蛋白461封閉多肽 大鼠血小板活化因子(PAF)檢測試劑盒elisa
大鼠神經少突膠質前體細胞MCF-7+luc人乳腺癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:MCF-7+luc細胞專用培養基125ML

MCF-7+luc人乳腺癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:MCF-7+luc細胞專用培養基500ML

MDA-KB2人乳腺細胞專用培養基英文名稱:MDA-KB2細胞專用培養基125ML

MDA-KB2人乳腺細胞專用培養基英文名稱:MDA-KB2細胞專用培養基500ML

MDA-MB-157人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-157細胞專用培養基125ML

MDA-MB-157人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-157細胞專用培養基500ML

MDA-MB-231人乳腺癌細胞專用培養基英文名稱:MDA-MB-231細胞專用培養基125ML


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