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小鼠腎小球上皮細胞

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更新時間:2023-04-23 10:09:10瀏覽次數:272

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
小鼠腎小球上皮細胞的相關產品:MFC-GFP (小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))1×10?cells/T25培養瓶人外周血淋巴細胞5×10?Cells/T25培養瓶SW620 (人結腸癌細胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶NRK-52E (大鼠腎細胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)5×10?Cells

詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠腎小球上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腎組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基suan、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調節水、電解質平衡及維護suan堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球上皮細胞是由間充質細胞分化發育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細胞,是腎小球的固有細胞之一,也是構成腎小球濾過膜的重要組成部分。腎小球上皮細胞的正常結構和功能是腎單位濾過及腎小球微環境穩定的重要保障。腎小球濾過膜的外層為上皮細胞層,厚約40nm,腎小球上皮細胞是腎小囊的臟層上皮細胞,貼附于腎小球血管外側基底膜上。上皮細胞又稱足細胞,足細胞的不規則突起為足突,其間有許多狹小間隙,血液經濾過膜過濾入腎小球囊。腎小球上皮細胞可通過合成和分泌腎上腺髓質肽抑制系膜細胞增殖,腎上腺髓質肽作為一種重要的旁分泌因子,可保持腎小球微環境穩定,并參與腎小球的炎癥過程。體外培養的腎小球上皮細胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

二磷腺苷核糖基化因子核苷交換因子2抗體 孤兒核受體蛋白Nur77封閉多肽 

CD34單克隆抗體 細胞分裂周期蛋白25C封閉多肽 

酪氨蛋白激受體B6抗體 細胞周期依賴性激抑制相關蛋白封閉多肽 

胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體 尿鹽重吸收轉運子1封閉多肽 

乙基丙二腦病蛋白抗體 1號染色體開放閱讀框25封閉多肽 

G蛋白偶聯受體128抗體 腺嘌呤核苷轉運蛋白1封閉多肽 

環指蛋白56抗體 β-葡萄糖腦苷脂封閉多肽 

神經營養因子HNT抗體 3-氨基-2-惡唑烷酮雞卵白蛋白偶聯物 

鋅指蛋白20抗體 碳酐4封閉多肽 

鋅指蛋白701抗體 重組人GUCY2C蛋白 

通用轉錄因子IIF亞基2/TFIIF RAP 30抗體 附睪精子結合蛋白1封閉多肽 

英文名稱: SGK1 原鈣粘附蛋白α4封閉多肽 

雌激調節蛋白LIV1/鋅轉運蛋白抗體 染色體區域穩定蛋白/核輸出蛋白1封閉多肽 

英文名稱: CR1 核受體共激活劑1封閉多肽 

MAN1C1蛋白抗體 血小板源性生長因子D/脊髓源性生長因子B封閉多肽 

β2-微球蛋白單克隆抗體 組織相關抗原HLA-B15封閉多肽 

開關相關蛋白70單克隆抗體 長鏈脂肪連接1/2封閉多肽 

SMCR7L蛋白抗體 粘附相關激封閉多肽 
小鼠腎小球上皮細胞人胚肺成纖維細胞培養基100mL人胚肺成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人胚肺成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人胚肺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胚肺成纖維細胞的體外培養。

RPMI-1640無糖(含HEPES)500mL-

William's E(含L-丙氨酰-)500mL-

人前列腺成纖維細胞培養基100mL人前列腺成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人前列腺成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人前列腺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人前列腺成纖維細胞的體外培養。

雞骨骼肌細胞培養基100mL雞骨骼肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持雞骨骼肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含雞骨骼肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞骨骼肌細胞的體外培養。

Ham's F-12(不含L-)500mL-

RPMI-1640培養基(含20%FBS)125mL×4RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy's 5A培養基,使用碳氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和癌細胞的培養,尤其是懸浮細胞的培養,是使用為廣泛的培養基之一。


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