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大鼠肌腱干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:46:28瀏覽次數(shù):242

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肌腱組織
大鼠肌腱干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1-B (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶SJSA-1 (人骨肉瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NOZ[NOZC-1] (人膽囊癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶RAG (小鼠腎腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?ce

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動(dòng)不同骨的運(yùn)動(dòng)。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,有收縮能力,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(TSCs)是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,其具有多向分化潛能,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原、中性dan白混合消化法并通過肌腱干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肌腱干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肌腱組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體 eIF3s8蛋白封閉多肽 

細(xì)胞核受體Rev-Erb beta抗體 鋅指蛋白826封閉多肽 

DNA甲基轉(zhuǎn)移-3α抗體 磷脂酰基醇蛋白聚糖1封閉多肽 

跨膜蛋白Orai2抗體 NPHP4蛋白封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體 T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1封閉多肽 

EMG1蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體124封閉多肽(腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物) 

結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體 磷化核糖體S6蛋白激封閉多肽 

PerCP標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體 ESPNL蛋白封閉多肽 

胞質(zhì)5',3'核苷抗體 Ⅰ型補(bǔ)體受體/C3b/C4b受體封閉多肽 

堿性成纖維細(xì)胞生長因子單克隆抗體 CD39樣蛋白1封閉多肽 

乙醇脫氫5抗體 分泌載體膜蛋白1封閉多肽 

英文名稱: Digoxin 線粒體二羧載體蛋白20封閉多肽 

豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框21封閉多肽 

紅細(xì)胞膜蛋白4.2抗體 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移8封閉多肽 

驅(qū)動(dòng)蛋白KNS1抗體 白介1β/IL-1β封閉多肽 

周期Y/X抗體 卵巢濾泡激封閉多肽 

3號(hào)染色體開放閱讀框65抗體 卷曲蛋白FZD7封閉多肽 

沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體 MEMO1蛋白封閉多肽 
大鼠肌腱干細(xì)胞人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

Hce-8693 (人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

人外周血單核細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人乳腺癌成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔氣管上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

CoC1/DDP (人卵巢癌細(xì)胞CoC1耐藥亞株) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+0.5-2μg/ml DDP+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

雞卵泡顆粒細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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