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大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:30:30瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 皮膚組織
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H1437人肺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H157人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-H1650[H1650](MKN-1)人肺支氣管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106NCI-h1688人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過(guò)早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過(guò)程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見(jiàn)到透明層。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

多配體蛋白聚糖1(CD138)抗體 CNOT6蛋白封閉多肽 人甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲氨(MASP)ELISA試劑盒

琥珀脫氫復(fù)合體亞基A抗體 鈣調(diào)磷B相關(guān)蛋白2封閉多肽 人周期依賴性激7(CDK-7)試劑盒ELISA

WNT蛋白家族Wnt8b抗體 突觸融合蛋白1B封閉多肽 人周期依賴性激2(CDK-2)ELISA檢測(cè)試劑盒

腎小球細(xì)胞粘附分子受體抗體 磷化14-3-3 β/ζ封閉多肽 人周期依賴性激1(CDK-1)elisa試劑盒

珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體 原鈣粘蛋白16封閉多肽 人磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)試劑盒elisa

英文名稱: CK20 DNA聚合εp59/DNA pol εp59封閉多肽 人乳脫氫(LDH)檢測(cè)試劑盒elisa

鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體 鐵調(diào)節(jié)蛋白25多肽 人解整合樣金屬9(ADAM9)ELISA試劑盒

英文名稱: NF-L 紡錘體樣蛋白3封閉多肽 人β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)試劑盒ELISA

英文名稱: ID1 絲氨/蘇氨蛋白激NEK8封閉多肽 人核苷磷化1(UPP1)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 磷肌醇3激接頭蛋白1封閉多肽 人乙醇脫氫(ADH)elisa試劑盒

黑色瘤相關(guān)抗原B1抗體 羥基類固醇脫氫3α/3α-羥類固醇脫氫Ⅰ封閉多肽 人乙醛脫氫(ALDH)試劑盒elisa

細(xì)胞分裂周期蛋白5樣蛋白抗體 KIAA1683蛋白封閉多肽 人Rho家族GTP1(RND1)檢測(cè)試劑盒elisa

血小板源性生長(zhǎng)因子受體B/PDGFRβ抗體 組蛋白去乙酰化1封閉多肽 人受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激2(RIPK2)ELISA試劑盒

神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體 RAS蛋白樣激活劑1封閉多肽 人磷脂爬行1(PLSCR1)試劑盒ELISA

帕金蛋白抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A封閉多肽 人3-羥基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA檢測(cè)試劑盒

氨基末端激1/2抗體 環(huán)指蛋白131封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員12(EAR12)elisa試劑盒

蛋白磷2A抑制劑1抗體 精子發(fā)生相關(guān)蛋白5樣蛋白1封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員3(EAR3)試劑盒elisa

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 HPS2蛋白封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員2(EAR2)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞Snu-387人肝癌細(xì)胞英文名稱:Snu-3871×1061640+10%FBS+1%L-+1%鈉+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

SNU-398人肝癌細(xì)胞英文名稱:SNU-3981×1061640+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

SU-DHL-2人B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞  英文名稱:SU-DHL-21×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

SU-DHL-4人B淋巴瘤細(xì)胞 英文名稱:SU-DHL-41×1061640+10%FBS+1%L-+1%鈉+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

sv-huc-1人膀胱上皮永生化細(xì)胞英文名稱:sv-huc-11×106F12K+10%FBS+1%PS提供STR鑒定報(bào)告

SW982 [SW-982]人滑膜肉瘤細(xì)胞英文名稱:SW982 [SW-982]1×106L15+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

SW1116人結(jié)腸腺癌細(xì)胞英文名稱:SW11161×106L15+10%FBS+1%P/S   生長(zhǎng)速度慢提供STR鑒定報(bào)告

 


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