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ELISA標準?加樣方法
閱讀:221 發布時間:2022-7-25酶聯免疫吸附測定(ELISA)因其具有敏感性高、特異性強等優點,被廣泛應用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單,但是小實驗里也蘊含著大文章,ELISA操作各個環節對實驗的檢測效果影響較大,稍不注意就會產生假陽性或假陰性的結果。
因ELISA的靈敏度較高,則應該按規定將血清稀釋至適當的倍數,以降低非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。 加樣品時,單孔用量要求:≥20ul/指標,如需要做2個復孔則血量≥60ul/指標。如果用量充足,最好提供50ul/孔/指標。具體用量也需根據試劑盒的要求而定。 吸取樣品時,加樣槍頭不應粘附多余的液體;加樣時不可90度向孔中滴加液體,否則會導致液體殘留在吸頭上,加樣不準確。正確加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
加樣時速度不可過快,否則無法保證微量加樣的準確性和均一性;要避免樣品加在孔壁上部而產生非特異性吸附。不可將樣品濺出以避免對鄰近孔產生污染。