小鼠卵巢顆粒細胞永生化公司正在出售的產品：鼻咽癌細胞株 5-8F（STR鑒定）人慢性髓系白血病細胞K562(STR鑒定正確)人肺癌腺癌細胞LC-2/AD  (STR鑒定正確)小鼠肝癌H22（種屬鑒定）人類原巨核細胞型白血病細胞UT-7(STR鑒定正確)人甲狀腺癌細胞 ACT-1(STR鑒定正確)人卵巢癌細胞UWB1.289+BRCA1 (STR鑒定正確)

一、細胞基本屬性

細胞詳述

卵巢是雌性動物的生殖器官。卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。

卵巢是分泌雌激素的主要器官。卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。卵巢中顆粒細胞是合成雌激素的場所。其產生過程是使雄烯二酮轉變成雌激素：內膜細胞在LH的作用下，使轉變為雄烯二酮；顆粒細胞在FSH的作用，發育過程中產生芳香化酶，它使雄烯二酮轉變成雌激素。形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。

注意事項：  收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養基是維持培養基，不能用來培養細胞。

細胞特性

1)  組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。

2)  細胞鑒定：卵泡刺激素受體(FSHR)免疫熒光染色為陽性。

3)  經鑒定細胞純度高于90%。

4)  不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)  細胞生長方式：不規則細胞，貼壁培養。

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

公司正在出售的產品：