詳細介紹
商品介紹:
工作原理: 在機體內部隨時都在發生著細胞的死亡。傳統上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現象出現的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活,細胞自身的染色質或DNA 被切割,出現單鏈或雙鏈缺口,并產生與 DNA 斷點數目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結合鏈酶親和素-熒光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 發射熒光,呈黃綠色。凋亡的細包核呈黃綠色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 |
保存條件:-20℃冰凍保存一年。
試劑盒內容:
1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml
2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封閉液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗抗體(× 100)20μl
6.SABC-FITC(× 100)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.抗體稀釋液 4ml
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
20T | 1~3天 |
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)elisa試劑盒英文名稱:FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白157抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子7(FGF7)elisa試劑盒英文名稱:FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白90B抗體包裝10MG
成纖維細胞生長因子3(FGF3)elisa試劑盒英文名稱:FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體包裝25g
成纖維細胞生長因子23(FGF23)elisa試劑盒英文名稱:FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白104抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子18(FGF18)elisa試劑盒英文名稱:FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白12抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子15(FGF15)elisa試劑盒英文名稱:FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白67抗體包裝25g
成纖維細胞生長因子13(FGF13)elisa試劑盒英文名稱:FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白129抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子12(FGF12)elisa試劑盒英文名稱:FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白107抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子11(FGF11)elisa試劑盒英文名稱:FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白18抗體包裝5g
成纖維細胞激活蛋白α(FAPα)elisa試劑盒英文名稱:FAPα ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白56抗體包裝1g
沉默調節蛋白6(SIRT6)elisa試劑盒英文名稱:SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白116抗體包裝5g
沉默調節蛋白1(SIRT1)elisa試劑盒英文名稱:SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白117抗體包裝1g
超氧化物歧化1(SOD1)elisa試劑盒英文名稱:SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白127抗體包裝100g
腸型脂肪結合蛋白(FABP2)elisa試劑盒英文名稱:FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白138抗體包裝25g
叉頭框蛋白P3(FOXP3)elisa試劑盒英文名稱:FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144NL抗體包裝5g
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質量規格:>99%,BR游離狀腺試劑盒2-O-乙酰山椒子烯酮;
龐蒂亞克亞硫鹽桿菌Sulfitobacter│pontiacus 質量規格:HPLC>98%,標準品游離睪酮試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖苷;Narin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格:>98%,BR游離蛋白S試劑盒異飛薊賓;Isosilybin
細胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)乙二胺四乙二鈉鈣鹽
其他 乙二胺四乙鈣二鈉;EDTA二鈉鈣;依地鈣二鈉二水合物;依地鈉鈣;EDTA 鈣鈉鹽
英文名稱: EDTA-2NaCa
其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid disodium calcium salt hydrate;Calcium disodium ethylenediaminetetraacetate hydrate
產品規格: 特純,97%
包裝:250克
CAS號:23411-34-9
C10H12N2O8CaNa2•xH2O=374.27 (anhydrous basis)
級別:purum
含量:≥97.0%
水溶解試驗:合格
水分:≤10.0%
性狀:結晶或結晶性粉末。溶于水和,幾乎不溶于有機溶劑。30℃時 0.1mol/L水溶液pH約7。鉛和其他重金屬離子交換鈣形成水溶性重金屬絡合物。有刺激性。商品也有含2分子結晶水的
用途:生化研究。絡合劑。食品、油脂、飲料的色澤穩定劑。調味劑
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