詳細介紹
組織來源:心臟組織
種屬來源:大鼠
細胞簡介:大鼠心肌細胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀;細胞培養2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點,并具有自發性節律搏動,且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節,研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
傳代比例:不傳代
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
大鼠心肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | A01X1527 |
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
大鼠心肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈梭形、多角形,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
小鼠主動脈平滑肌細胞 | COR-L23/R細胞 |
磷化信號轉導和轉錄激活因子3重組兔單克隆抗體 | 早期B淋巴細胞因子1抗體 |
COLO668細胞 | 突觸融合蛋白結合蛋白5抗體 |
COLO679細胞 | 磷化細胞外信號調節激5抗體 |
COLO684細胞 | 轉錄因子OTX2抗體 |
COLO741細胞 | 扭轉原腸胚形成同源蛋白1抗體 |
COLO792細胞 | 血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體 |
COLO829細胞 | CD299抗體 |
COLO-60H細胞 | 視神經細胞相關蛋白/早老結合蛋白抗體 |
COLO-680N細胞 | 破傷風毒重鏈抗體 |
COLO-94H細胞 | 抗利尿激受體1B抗體 |
COLON26細胞 | 大鼠心肌細胞表皮生長因子樣蛋白2抗體 |
COR-L105細胞 | 富含亮氨重復序列Nogo受體反應蛋白4抗體 |
COR-L23細胞 | 周期蛋白結合蛋白抗體 |
DMS79細胞 | 磷化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 |
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。