化工儀器網
詳細介紹
羊肺動脈內皮細胞
培養基：原代內皮細胞培養體系
傳代特性：根據細胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：肺動脈血管內皮細胞是一種多功能細胞，尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當其受損，肺血管通透性升高導致肺水腫，在成年人呼吸窘迫綜合癥發生機制中具有重要意義。但是處于體內多因素共同作用的復雜環境中，對肺血管內皮細胞的功能和代謝以及病變發生機制很難作深入研究。原代肺動脈內皮細胞的體外培養系統有助于在特定的體外條件下研究肺血管內皮細胞的功能。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 羊肺動脈內皮細胞 | 商品貨號 | A01X2289 |
組織來源 | 肺動脈組織 | 種屬來源 | 羊 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態 | 上皮樣，多角形細胞 |
原代細胞分離培養的思路：
取材--分離--培養--鑒定
首先將組織從機體中取出，經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養基中培養，使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻，鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中，置于37℃、5％CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含素的混合培養基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產品：
小鼠胰腺腺泡細胞 | 人肝實質細胞 |
血小板膜糖蛋白Ⅱb（CD41）重組兔單抗 | AF350標記的ENAH蛋白抗體 |
兔角膜基質細胞 | AF350標記的磷化中心粒蛋白Nudel抗體 |
人結腸黏膜上皮細胞 | AF350標記的AICAR甲酰基轉移抗體 |
小鼠肝竇內皮細胞 | AF350標記的腫瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激結合蛋白抗體 |
大鼠肝竇內皮細胞 | AF350標記的蛋白激A受體2α亞基抗體 |
兔羊膜胚胎細胞 | AF350標記的末端多聚腺苷1蛋白抗體 |
人直腸黏膜上皮細胞 | AF350標記的脂肪組織分化相關蛋白抗體 |
小鼠肝星狀細胞 | AF350標記的回腸絨毛刷狀緣膜蛋白抗體 |
大鼠肝星狀細胞 | AF350標記的胰島樣生長因子I受體抗體 |
兔臍帶間充質干細胞 | AF350標記的GDNF家族受體α3抗體 GFR α3 |
人肝內膽管上皮細胞 | 羊肺動脈內皮細胞AF350標記的鈣結合蛋白Calponin抗體 |
小鼠直腸平滑肌細胞 | AF350標記的畸形表皮自調節因子1抗體 |
大鼠直腸平滑肌細胞 | AF350標記的RAS家族關聯結構域蛋白6抗體 |
兔腸動脈內皮細胞 | AF350標記的TBC結構域TBCD4蛋白抗體 |
注意事項：
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網