詳細介紹
大鼠腮腺細胞
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:大鼠腮腺細胞分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對,腮腺、舌下腺和頜下腺,其中大的一對是腮腺。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞,是一種營養需要復雜、在一般合成培養基中不易生長,體外培養比較困難。目前,DMEM培養液被認為較適于腺細胞的培養。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化。另外,接種的細胞密度也是培養成功的關鍵因素之一,尤其是在腺細胞這種單層細胞培養時,接種的細胞總數量和生長基質表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 大鼠腮腺細胞 | 商品貨號 | A01X1620 |
組織來源 | 腮腺組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
原代細胞分離培養的思路:
取材--分離--培養--鑒定
首先將組織從機體中取出,經胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞,再在合適的培養基中培養,使細胞繁殖到一定系數后進行細胞鑒定。
實驗步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質。
五、大腦皮質放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養液懸浮混勻,鋪于經離心形成連續梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養皿中,置于37℃、5%CO2培養箱內靜置培養24h后更換不含素的混合培養基,隨后隔天換液。
公司正在出售的產品:
大鼠前列腺上皮細胞 | MHCC-97H+luc人高轉移性肝癌細胞熒光標記 |
基質金屬蛋白-12重組兔單克隆抗體 | β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌細胞熒光標記 | 腫瘤/睪丸抗原13抗體 |
MDA-MB-361人乳腺癌細胞 | 假定腫瘤抑制亮氨拉鏈蛋白1抗體 |
MDA-MB-415人乳腺癌細胞 | 促甲狀腺β亞單位抗體 |
MDA-MB-435S人黑瘤細胞 | 細胞周期蛋白依賴性激調節亞基1抗體 |
MDA-MB-436人乳腺癌細胞 | 成纖維細胞生長因子22抗體 |
MDA-MB-453人乳腺癌細胞 | Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 |
MDA-MB-468人乳腺癌細胞 | 神經細胞特異性轉錄因子DAT1抗體 |
ME-180人子宮頸表皮癌細胞 | Rh血型C抗原抗體 |
MEG-01人成巨核細胞白血病細胞 | 同源轉錄調節蛋白Sin3A抗體 |
MET-5A人膜間皮細胞 | 大鼠腮腺細胞癌基因ETS2抗體 |
MG63人骨肉瘤細胞 | 腦組織表達X連鎖蛋白1抗體 |
MGC-803人胃癌細胞 | Rho相關結構域BTB蛋白質1抗體 |
MV-4-11人髓性單核細胞白血病細胞 | 組蛋白H2A/S抗體 |
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。