人肺成纖維細胞公司正在出售的產品：人結腸平滑肌細胞人晶狀體上皮細胞人淋巴管內皮細胞人卵巢癌組織源細胞人卵巢成纖維細胞人脈絡膜微血管內皮細胞人毛囊干細胞BF 人B因子ELISA檢測試劑盒C1INH 人補體1抑制物抗體ELISA檢測試劑盒C3bR 人補體片段3b受體ELISA檢測試劑盒C3SP 人補體3裂解產物ELISA檢測試劑盒GHAb 人抗生長激抗體ELISA檢測試劑盒Sam 人可溶性粘附分子EL

組織來源：肺組織

種屬來源：人

細胞簡介：人肺成纖維細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于 心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故 稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分 ，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或 星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛 ，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維 細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重 要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基：中。30min細胞貼 壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁全，伸展成梭形，胞 核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細 胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形 ，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成 纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持肺器官的正常形態，合成和釋放細胞 外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液：0.25%胰dan白酶

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

傳代比例：1:2
一、細胞基本屬性

二、細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

三、使用方法

人肺成纖維細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

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四、注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。