詳細介紹
組織來源:臍帶
種屬來源:人
細胞簡介:臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化,臍動脈和臍靜脈就發達起來,在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行 CO2 和 O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將 O2 和營養物質從胎盤運送給胎兒。后由子宮靜 脈將來自胎兒的代謝廢物運走,某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶 中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結出各種不 同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和 多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,又可進 一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞(MSC) 是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下,可分化為多種造血細胞以外的組織細胞,并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用;目前,多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子,促進造血干細胞(HSC)的增殖與分化。 MSCs 還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用,可減輕移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相關并發癥。
培養基:含 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin 等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液:0.25%胰dan白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規格 | 商品貨號 |
人臍帶間充質干細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | A01X1497 |
二、細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
三、使用方法
人臍帶間充質干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在技術部標準操作流程下,細胞可傳2-3代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml培養基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;
4)待細胞貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品:
人前列腺上皮細胞 | 人外周血單個核細胞 |
多巴胺受體D1重組兔單克隆抗體 | 環磷鳥苷抗體 |
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人食管癌組織源成纖維細胞 | β-葡萄糖腦苷脂重組兔單克隆抗體 |
人食管癌組織源細胞 | 增強型黃色熒光蛋白單克隆抗體 |
人食管平滑肌細胞 | CD27重組兔單克隆抗體 |
人食管上皮細胞 | 基質金屬蛋白3重組兔單克隆抗體 |
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人胎盤間充質干細胞 | 環氧合2重組兔單克隆抗體 |
人胎盤絨毛膜滋養層細胞 | TAP-Tag(標簽)單克隆抗體 |
人退行性椎間盤髓核細胞 | 白介1β/IL-1β重組兔單克隆抗體 |
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。